資料簡介
免疫組化試劑盒說明書
SP-0023
HistostainTM-Plus Kits
免疫組化染色試劑盒
簡介
上海瑞齊生物科技有限公司提供的美國RD公司SP系列試劑盒,全稱為過氧化物酶標記的鏈酶卵白素(Streptavidin/Peroxidase)染色試劑盒。該方法由美國RD公司于1986年首建。由于鏈霉卵白素的分子量是60kDa,有四個亞基可和生物素結合,等電點為6.5,所以該方法具有靈敏度高、特異性強、背景清晰、成本低廉的優(yōu)點,是理想的免疫組化染色方法。
試劑盒內容
試劑(無色液體):3%H2O2去離子水 3ml、6ml或18ml
試劑A(藍色液體):封閉用正常山羊血清工作液 3ml、6ml或18ml
試劑B(黃色液體):生物素化二抗工作液(IgG/Bio) 3ml、6ml或18ml
SP-0022:生物素標記山羊抗兔、大鼠、和豚鼠IgG
SP-0023:生物素標記山羊抗兔IgG
SP-0024:生物素標記山羊抗小鼠IgG
試劑C(橙色液體):辣根酶標記鏈霉卵白素工作液(S-A/HRP) 3ml、6ml或18ml
標本染色
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。 7、滴加試劑B(黃色液體),
2、蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘(如需 室溫或37℃孵育15-20分鐘
采用抗原修復,在此步驟后進行)。 8、PBS沖洗,3分鐘×3次
3、3%H2O2去離子水(無色液體) 9、滴加試劑C(橙色液體),室溫37℃
孵育15-20分鐘,以消除內源性過 孵育15-20分鐘
氧化物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 10、PBS沖洗,3分鐘×3次
分鐘,傾去,勿洗 11、顯色劑顯色(DAB或AEC)
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 12、自來水充分沖洗
小時或4℃ 13、如果需要,可進行復染,脫水,透明
6、PBS沖洗,3分鐘×3次 14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
保存方法:
2-8℃避光保存。
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