人5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白（5-HTT）ELISA試劑盒

產(chǎn)品名稱：人5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白（5-HTT）ELISA試劑盒

預期應用：本試劑盒是一個夾心酶免疫分析法體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關生物液體。試劑準備：

1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

標本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨，該過程需在冰上進行（有條件實驗室可選用機器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復凍融法可重復2 次）。

3） 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘，留取上清即可檢測。

4、其它生物標本：請1000×g 離心20 分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。

產(chǎn)品名稱：人5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白（5-HTT）ELISA試劑盒

注意事項

　　1. 試劑盒嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

　　2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

　　3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

　　4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

　　5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

　　6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

　　7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

　　8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

　　9. 不能使用過期產(chǎn)品。