2*8cm/8*12cm/定制規(guī)格 乙酸纖維素薄膜
| 參考價 | ￥10.00-￥240.00 |
- 公司名稱 濰坊中科醫(yī)療設備有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號2*8cm/8*12cm/定制規(guī)格
- 所在地濰坊市
- 廠商性質(zhì)代理商
- 更新時間2023/9/13 18:27:29
- 訪問次數(shù) 1697
| 規(guī)格1 | 88.00元 | 1000 件 可售 |
| 規(guī)格2 | 240.00元 | 1000 件 可售 |
| 規(guī)格3 | 10.00元 | 1000 件 可售 |
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| 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 價格區(qū)間 | 面議 |
|---|---|---|---|
| 儀器種類 | 國產(chǎn)設備 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要設備 | 電泳儀 | 規(guī)格1 | 2*8cm |
| 規(guī)格2 | 8*12cm | 規(guī)格3 | 定制尺寸 |
血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳生物化學實驗
一、實驗目的
學習醋酸纖維薄膜電泳的操作，了解電泳技術的一般原理。
二、實驗原理
電泳是指帶電質(zhì)點在電場中向本身所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象。在一定pH條件下，不同的質(zhì)點由于具有不同的等電點而帶不同性質(zhì)的電荷，因而在一定的電場中它們的移動方向和移動速度也不同，即它們的電泳遷移率不同，因此，可使它們分離 影響電泳遷移率的外界因素：電場強度、溶液的pH值、溶液的離子強度和電滲現(xiàn)象 影響電泳遷移率的內(nèi)在因素：質(zhì)點所帶凈電荷的量、質(zhì)點的大小和形狀 采用醋酸纖維薄膜作為支持物的電泳方法稱為醋酸纖維素薄膜電泳。醋酸纖維素薄膜電泳具有微量、快速、簡便、分辨力高，對樣品無拖尾和吸附現(xiàn)象等優(yōu)點 醋酸纖維素是纖維素的羥基乙?；纬傻睦w維素醋酸酯，將它溶于有機溶劑（如：丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）后，涂抹成均勻的薄膜則成為醋酸纖維素薄膜。該膜具有均一的泡沫狀的結構，厚度約為120 μm，有很強的通透性，對分子移動阻力很小。
三、實驗儀器
1、DYY-8C型常壓電泳儀：北京六一儀器廠生產(chǎn)，1套/2組。
2.醋酸纖維薄膜（2 cm×8cm）：2片/人。
3.培養(yǎng)皿：一排桌子（即4組）公用5套，包括平衡、染色各用一套，漂洗用3套。
4.點樣器：一個/組。
5.濾紙：公用。
6.玻璃板：一塊/組。
7.鑷子：一個/組。
8.玻棒：公用。
四、實驗試劑
1．BBT緩沖液（pH8.6，離子強度0.07）：BBT2.76g，BBTN15.45g，用蒸餾水定容至1000mL。
2．染色液：氨基黑10B 0.25g，用甲醇50mL、冰醋酸10mL、水40mL溶解（可重復使用）。
3．漂洗液：甲醇或乙醇45mL，冰醋酸5mL，水50mL，混勻。
4.人或動物血清：從醫(yī)院或自制，冰凍保存，現(xiàn)取現(xiàn)用。
五、實驗過程
浸泡：將2×8 cm醋酸纖維薄膜迎著光辨別光澤面和無光澤面。將粗糙面朝上置于盛有緩沖液的平皿中，浸泡20min方可用于點樣
點樣：用鑷子取出浸透的薄膜，夾在兩層粗濾紙內(nèi)吸干多余的緩沖液，然后平鋪在玻璃板上（無光澤面朝上）。在另一載玻片上滴一滴血清，點樣器（用蓋玻片的一邊）在血清上蘸一下（可來回移動一次），再將點樣器輕印在加樣線上，使血清滲透到薄膜內(nèi)，形成均勻的直線。
五、實驗過程
電泳槽的準備：根據(jù)電泳槽膜支架的寬度，裁剪尺寸合適的濾紙條。在兩個電極槽中，各倒入等體積的電泳緩沖液，在電泳槽的兩個膜支架，各放兩層濾紙條，使濾紙一端的長邊與支架前沿對齊，另一端浸入電泳緩沖液中。當濾紙全部潤濕后，用玻璃棒輕輕擠壓在膜支架上的濾紙以驅(qū)趕氣泡，使濾紙的一端能緊貼在膜支架上，即為濾紙橋。
電泳：將點樣端的薄膜平貼在陰極電泳槽支架的濾紙橋上（點樣面朝下），另一端平貼在陽極支架上。蓋上電泳槽蓋，使薄膜平衡10 min。通電，調(diào)節(jié)電壓至160 V，電流強度為0.4～0.6 mA/cm膜寬度，電泳時間約25 min。
染色：電泳完畢后將薄膜取下, 放在含氨基黑10B染色液的培養(yǎng)皿中浸泡5 min。
漂洗：將薄膜從染色液中取出后移置漂洗液中漂洗數(shù)次，直至背景藍色脫盡，條帶清晰為止，可得到色帶清晰的電泳圖譜。
六、注意事項
保持薄膜清潔，務必戴上塑料手套，勿用手指接觸薄膜表面，以免油污或污物沾上，影響電泳結果。注意醋酸纖維膜的質(zhì)量，至少浸泡10分鐘，浸泡很久仍有大塊白色硬點者須棄之不用。加樣時一定要呈直線、垂直、分布均勻，這樣泳動的區(qū)帶整齊、不歪。以免影響蛋白質(zhì)區(qū)帶圖譜。電泳槽兩邊的緩沖液應保持液面在同一水平面上，槽里的緩沖液要保持清潔。電泳電壓大小，時間長短與緩沖液的離子強度都有一定的關系。一般電流約0.4—0.6mA/cm,電壓110—160V 。
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