abs60256 PM原代細胞質粒DNA轉染試劑盒

產(chǎn)品介紹：
這款產(chǎn)品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基礎上進一步優(yōu)化研發(fā)成功的專門用于原代細胞質粒DNA轉染的轉染試劑。它具有非常好的轉染性能，可高效轉染多種原代細胞，轉染效率高達70%以上（EGFP質粒）。與目前市場上常見的脂質體轉染試劑不同，這款產(chǎn)品采用生物可降解材料配制，對細胞的毒性很低，轉染后細胞死亡率不到10%。使用也非常方便，先將轉染試劑與質粒DNA混合，再將轉染試劑-DNA復合物直接加入培養(yǎng)細胞中，血清不影響其轉染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液，操作十分簡便。

產(chǎn)品特點

1、強大的細胞轉染性能：可高效轉染多種原代細胞，轉染效率可高達85%以上；
2、 極低的細胞毒性：使用可降解生物材料，細胞毒性低，轉染細胞死亡率不到10%，大大降低了因細胞毒性對實驗結果的影響，實驗結果更為客觀；
3、操作簡便，可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞的轉染，轉染前后不需要更換培養(yǎng)液。

方法步驟（以24孔板轉染為例）:

A、細胞接種:
1、轉染前24小時左右對細胞進行轉接，培養(yǎng)過夜；
2、確保轉染時細胞密度為90%左右；
3、最好在轉染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉染后孵育 階段細胞密度太大、營養(yǎng)不足導致細胞死亡。

B、PM /DNA轉染復合物制備(該步完成后應立即進行轉染):
1、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer，再加入適量的轉染 試劑，見附表。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
2、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer，輕輕混勻，再加入適量的DNA，見附表。用移液器再次輕輕 混勻后在室溫靜置5分鐘。
3、將DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15~20分后，立即轉染。注意： PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要，切勿顛倒。

注意：離心管最好使用聚丙烯離心管。

C、轉染:

1、將步驟B制備的轉染復合物滴加至培養(yǎng)基中，邊加邊輕輕晃動培養(yǎng)板以使復合物均勻分布。加完后，立即將培養(yǎng)板轉入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2、培養(yǎng)12小時后即可觀察，最佳觀察或收獲時間為24~48小時。
3、PM在培養(yǎng)基中仍有較高的轉染效率，因此轉染前后不需要換成無血清或低血清培養(yǎng)基。如果轉染后需要更換新鮮培養(yǎng)基，請于加入PM /DNA復合物12~24小時后進行。

附表：不同培養(yǎng)體系推薦初始轉染條件

儲存/保存方法：

-20℃避光保存，Trans buffer 可保存于2-8°C，有效期1年，使用前輕輕混勻。

試劑盒包裝：

產(chǎn)品用途：

大鼠肝細胞、血管平滑肌細胞、血管內皮細胞、肺泡上皮細胞、乳腺癌細胞、肺癌細胞、大腸癌細胞、肝癌細胞等。

* 注意： 本產(chǎn)品僅用于科研實驗