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YXB2836 免疫共沉淀凝膠 蛋白AG瓊脂糖凝膠 ProteinAG Berpharose FF

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 南京億迅生物科技有限公司
  • 品牌
  • 型號(hào) YXB2836
  • 產(chǎn)地 江蘇 南京
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間 2024/7/23 7:25:59
  • 訪問次數(shù) 272

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南京億迅生物科技有限公司是一家集生物技術(shù)咨詢、實(shí)驗(yàn)室耗材、科研試劑的銷售、推廣和售后服務(wù)為一體的高科技生物企業(yè),為各大科研機(jī)構(gòu)、高校、生物企業(yè)提供相關(guān)產(chǎn)品。公司憑借良好的產(chǎn)品質(zhì)量和營(yíng)銷團(tuán)隊(duì)的奮力開拓,市場(chǎng)空間逐步擴(kuò)大,營(yíng)銷網(wǎng)絡(luò)覆蓋全國(guó),為客戶供應(yīng)服務(wù),優(yōu)質(zhì)、用心的服務(wù)贏得了眾多企業(yè)的信賴和好評(píng),在生物設(shè)備領(lǐng)域迅速崛起。

 

公司主營(yíng)生物試劑,化學(xué)試劑,人工配置的各類溶液,包括人工血清,人工胃液,人工尿液等等。動(dòng)物血清,動(dòng)物紅細(xì)胞,抗體,質(zhì)控樣品,干擾物質(zhì),抗原,生化試劑,實(shí)驗(yàn)耗材等10萬余種。

 

億迅生物總部位于南京,在其他城市也設(shè)有辦事處,具有一支專業(yè)的營(yíng)銷團(tuán)隊(duì),均為本科、碩士、博士學(xué)歷或相關(guān)專業(yè)從業(yè)多年的人才,有很強(qiáng)的凝聚力和創(chuàng)造力,在產(chǎn)品的營(yíng)銷方面有著豐富的經(jīng)驗(yàn),且對(duì)生物設(shè)備有著深刻的認(rèn)識(shí)和見解。公司堅(jiān)持以技術(shù)為基礎(chǔ),以品質(zhì)求發(fā)展,著力打造生物試劑,并與國(guó)內(nèi)很多科研院所、學(xué)校、檢測(cè)機(jī)構(gòu)等制定銷售計(jì)劃,售后服務(wù)網(wǎng)絡(luò)也日益健全。

 

公司以“用戶為中心,用心服務(wù)”為核心價(jià)值,始終把滿足客戶需求、提供全面服務(wù)作為服務(wù)宗旨,在不斷的發(fā)展和完善過程中提升技術(shù)服務(wù)水平。我們相信,通過我們的不斷努力和追求,一定能夠?qū)崿F(xiàn)與客戶的互利共贏!

試劑

免疫共沉淀凝膠 蛋白AG瓊脂糖凝膠 ProteinAG Berpharose FF
蛋白A蛋白G瓊脂糖凝膠FF

(Protein AG-Berpharose FF)

產(chǎn)品介紹
蛋白A蛋白G瓊脂糖凝膠FF是將重組蛋白A蛋白G融合蛋白鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的親和分離介質(zhì)。同單獨(dú)的蛋白A或蛋白G分離介質(zhì)相比,具有更寬廣的結(jié)合范圍,同時(shí)融合后的r-PAG降低了對(duì)pH值的依賴,允許在pH5-8進(jìn)行結(jié)合。本產(chǎn)品多用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,及抗體固定及其它相關(guān)研究。

規(guī)格
1ml(預(yù)裝柱)、5ml(預(yù)裝柱)、10ml(預(yù)裝柱)、25ml、100ml、500ml 純化流程

以免疫共沉淀(Co-IP)舉例:

結(jié)合緩沖液:20mM磷酸緩沖液、150mMNaCl、pH7.0

洗脫緩沖液:0.1M甘氨酸,PH3.0

中和緩沖液:1 M Tris-HCl,pH 8.5

(注:所用過柱液體在使用之前建議用至少小于等于0.45μm濾膜過濾)

(1)樣品預(yù)處理:細(xì)胞、植物、動(dòng)物組織裂解液樣品,最終總蛋白濃度選擇在0.5-1.0ug/ul范圍內(nèi)為宜,上樣前要確保樣品溶液擁有合適的離子強(qiáng)度和pH值(如:可以用結(jié)合緩沖液對(duì)樣品液進(jìn)行稀釋或透析);哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)有多種成分可以和IgG發(fā)生結(jié)合,可能會(huì)在后續(xù)免疫印跡中出現(xiàn)非特異性條帶,可通過加入Normal IgG和Protein AG-Berpharose FF的方式預(yù)處理裂解液樣品,以降低非特異性結(jié)合。

(2)抗原-抗體復(fù)合物制備:將抗體與含有目的蛋白的裂解液混合,室溫震蕩孵育30-60min(或4-8度孵育過夜),形成抗原-抗體復(fù)合物(可根據(jù)已優(yōu)化好的抗原抗體結(jié)合條件處理)。

(注意:抗體的加入量要依據(jù)填料量,抗體的加入量過多會(huì)影響到抗原-抗體混合物與填料的結(jié)合,故建議抗體加入量為填料載量的80%)

(3)填料平衡:取適量的Protein AG Berpharose FF加入到2ml離心管中,500 r離心1min,棄上清,加入0.5ml結(jié)合緩沖液,懸浮填料,500 r離心1min,棄上清,重復(fù)兩次。

(4)抗原-抗體復(fù)合物的吸附:將抗原-抗體復(fù)合物加入到平衡好的填料中,均勻,在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,促使樣品和填料充分接觸并吸附,約30min后,500 r離心1min,取上清液,留樣檢測(cè)。

(5)除雜清洗:向上述離心管中加入0.5ml的結(jié)合緩沖液,懸浮填料,進(jìn)行清洗,500 r離心1min,吸棄上清,重復(fù)兩次。

(6)抗原洗脫:

①非變性洗脫法(洗脫的樣品保持原有的生物活性,可用于后期功能分析):向離心管中加入5倍柱體積的洗脫緩沖液,用移液器吹打5次,混勻,然后在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管10min后,500 r離心1min,吸取上清液,收集洗脫組分,即為目標(biāo)抗原,收集上清液至新的離心管中,并立即加入十分之一體積的中和緩沖液中和緩沖液調(diào)節(jié)其pH至中性,用于后期功能分析。

②變性洗脫法(洗脫的樣品適用于SDS-PAGE檢測(cè)):向離心管中加入25ul 1×SDS-PAGE Loading Buffer混合均 勻,95℃加熱5min。然后進(jìn)行離心,200 r離心1min,收集上清液,進(jìn)行SDS-PAGE電泳,轉(zhuǎn)膜后進(jìn)行

Western分析。


免疫共沉淀凝膠 蛋白AG瓊脂糖凝膠 ProteinAG Berpharose FF


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