兔肝實質(zhì)細(xì)胞

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！

產(chǎn)品名稱：兔肝實質(zhì)細(xì)胞

組織來源：肝臟

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1代，不建議傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞簡介：

兔肝實質(zhì)分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝實質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化：急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞，生長營養(yǎng)需求高，在體外存活時間短；細(xì)胞呈圓形或多角形，核大而圓，居中，常染色質(zhì)豐富，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官，在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。

方法簡介：

實驗室分離的兔肝實質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的兔肝實質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠熱休克蛋白試劑盒   小鼠熱休克蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠熱休克蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠熱休克蛋白試劑盒、小鼠熱休克蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠熱休克蛋白9試劑盒   小鼠熱休克蛋白9試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠熱休克蛋白9試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠熱休克蛋白9試劑盒、小鼠熱休克蛋白9試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒   小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒、小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒   小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒、小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit G(IgG)試劑盒

HumanCeruloplasmin,CP/CERELISAKit 人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Equinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/ELA試劑盒馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母β-(β-AMYLASE)活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑20次

Mousecoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

KIAA1161蛋白抗體

甲基化樣蛋白7B抗體

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

Kruppel樣因子4(KLF4)重組蛋白 Recombinant Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4)

RNASE1重組人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

GPT2 Protein Rat 重組大鼠 GPT2 蛋白

阿黑皮素原(POMC)重組蛋白 Recombinant Proopiomelanocortin (POMC)

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

AIF1重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 Protein

兔肝實質(zhì)細(xì)胞大鼠膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)試劑盒 ，英文名： ANXA5 ELISA Kit

Mouse ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 小鼠原激活肽(TAP)試劑盒

Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGGT(Humangammaglamylanspeptidase)ELISAKit人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶

細(xì)胞甘油-3-0酸脫氫酶-2(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase-2)活性比色法定量試劑盒20次

RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒規(guī)格：96T/48T