ELISA/ ELISpot檢測服務(wù)
- 公司名稱 北京義翹神州科技股份有限公司
- 品牌 義翹神州/Sino Biological
- 型號
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/1/26 15:27:32
- 訪問次數(shù) 11
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酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）概論
酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay，簡稱ELISA）是指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。ELISA過程包括抗原（抗體）吸附在固相載體上稱為包被，加待測抗體（抗原），再加相應(yīng)酶標(biāo)記抗體（抗原），生成抗原（抗體）——待測抗體（抗原）——酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物，再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計(jì)的光吸收可以計(jì)算抗體（抗原）的量，待測抗體（抗原）的定量與有色產(chǎn)生成正比。
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)/酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISpot)檢測服務(wù)
酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù) (enzyme-linked immunospot assay, ELISpot) 是細(xì)胞免疫學(xué)研究中敏感的檢測方法之一，能夠區(qū)分活化的T細(xì)胞亞群，可以在單細(xì)胞水平對抗體分泌細(xì)胞及細(xì)胞因子分泌細(xì)胞進(jìn)行檢測。在疫苗研究中，ELISpot是一種標(biāo)準(zhǔn)工具，用于通過測量激發(fā)強(qiáng)大T細(xì)胞反應(yīng)的能力 (通常是干擾素-γ的分泌) 來確定疫苗的有-效性。為滿足客戶的檢測需求，義翹神州可提供ELISA檢測服務(wù)和ELISpot檢測服務(wù)。
ELISA檢測服務(wù)
優(yōu)點(diǎn) | 擁有龐大的產(chǎn)品庫：6,000多種優(yōu)質(zhì)ELISA應(yīng)用抗體，500多種ELISA試劑盒。 |
周期 | 3-5個工作日 |
服務(wù)類型 | 雙抗夾心法ELISA檢測、間接法ELISA檢測、競爭法ELISA檢測 |
ELISpot檢測服務(wù)
優(yōu)點(diǎn) | 高靈敏度：百萬分之一陽性細(xì)胞檢測率。 |
周期 | 2-3個工作日 |
交付內(nèi)容 | 提供斑點(diǎn)圖像、陰陽性檢測結(jié)果、對比免疫反應(yīng)強(qiáng)弱及細(xì)胞因子分泌量比較等多項(xiàng)結(jié)果分析數(shù)據(jù) |
ELISA/ELISpot檢測技術(shù)服務(wù)流程
ELISpot檢測服務(wù)案例
在臨床試驗(yàn)和候選疫苗中，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）是發(fā)揮細(xì)胞免疫的一類重要細(xì)胞。而 IFN-γ 作為免疫活性細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子在誘導(dǎo)抗病毒免疫中起著重要的免疫調(diào)理作用，因此 IFN-γ 的ELISpot是評價(jià)抗原特異性T細(xì)胞免疫的金標(biāo)準(zhǔn)。
ELISpot檢測小鼠T細(xì)胞經(jīng)特異性肽段刺激分泌IFN-γ 的情況
ELISpot檢測小鼠T細(xì)胞經(jīng)特異性肽段刺激分泌IL-4 的情況
1. ELISA/ELISpot檢測服務(wù)常見問題解答
| 方法 | ELISpot | ELISA |
| 原理 | 都是基于抗原抗體反應(yīng)，ELISpot實(shí)際上是雙抗夾心法ELISA的延伸和新的發(fā)展，可以看做單細(xì)胞水平的ELISA。 | |
| 樣品形式 | 活細(xì)胞 | 懸濁液/上清 |
| 測定對象 | 分泌某種細(xì)胞因子或抗體的細(xì)胞頻率 | 樣本中的某蛋白含量 |
| 分辨率 | 高 | 無法檢測細(xì)微的差別 |
| 靈敏度 | ELISpot可精確到檢測出幾十萬甚至百萬個淋巴細(xì)胞中的一個活化細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌。 | 比ELISpot低百倍 |
| 雙重檢測 | 能 | 不能 |
| 儲存時間 | 數(shù)周至數(shù)月 | 幾個小時 |
| 檢測設(shè)備及檢測方式 | AID ELISpot Reader 通過顯色反應(yīng)，在分泌細(xì)胞因子的細(xì)胞位置顯現(xiàn)清晰斑點(diǎn)，進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而計(jì)算出分泌該細(xì)胞因子的細(xì)胞頻率。 | ELISA Reader 通過顯示反應(yīng)，測吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較得出可溶性蛋白總量 |
2. 為什么選擇ELISpot進(jìn)行檢測？
①高靈敏度：百萬分之一陽性細(xì)胞檢測率，比ELISA靈敏度高百倍
②單細(xì)胞水平檢測
③活細(xì)胞功能檢測：檢測到的細(xì)胞因子不是已存在的，而是在檢測過程中，被加入的刺激物刺激而分泌出來的
④直觀、可信度高：一個陽性細(xì)胞一個斑點(diǎn)，斑點(diǎn)數(shù)量代表分泌細(xì)胞因子的細(xì)胞數(shù)量多少，斑點(diǎn)大小代表該細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平的多少
⑤高通量檢測(一塊ELISpot板可作96test）：每天可檢測數(shù)百個樣品
⑥經(jīng)過凍存復(fù)蘇的細(xì)胞并不喪失免疫功能
3. ELISpot檢測的一般步驟是哪些？適用于哪些細(xì)胞的檢測？
淋巴細(xì)胞受到抗原刺激后局部產(chǎn)生細(xì)胞因子，此細(xì)胞因子被ELISpot板底PVDF 膜上（預(yù)包被的）的特異性單抗捕獲。去除細(xì)胞后，被捕獲的細(xì)胞因子與生物-素標(biāo)記的單抗結(jié)合，其后再與堿性磷-酸酶或辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素結(jié)合。加底物顯色后，PVDF 膜上出現(xiàn)紫色或紅褐色的斑點(diǎn)表明細(xì)胞產(chǎn)生了細(xì)胞因子，通過ELISPot Reader對斑點(diǎn)的進(jìn)行計(jì)數(shù)和分析。
理論上講，所有能分泌細(xì)胞因子的細(xì)胞都可以用ELISpot進(jìn)行檢測分析。實(shí)際應(yīng)用中常見的檢測細(xì)胞類型包括：外周血淋巴細(xì)胞（PBMC）、骨髓、或者中樞神經(jīng)系統(tǒng)和淋巴組織的單細(xì)胞懸液。
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詳細(xì)信息可查看義翹神州，或者可加微信“sinobio2023”進(jìn)行聯(lián)系。
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