免疫組化檢測(cè)
- 公司名稱 上海博谷生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/2/17 17:27:15
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免疫組化實(shí)驗(yàn)步驟:
1.包埋好的標(biāo)本用石蠟切片機(jī)切片3um
2.經(jīng)60℃烘片1小時(shí)
3.二甲苯Ⅰ脫蠟10分鐘
4.二甲苯Ⅱ脫蠟10分鐘
5.梯度酒精復(fù)水:100%酒精5分鐘,100%酒精5分鐘,95%酒精5分鐘,80%酒精5分鐘,自來(lái)水沖洗 5分鐘
6.進(jìn)行抗原修復(fù):將切片置于0.1mol/L且ph=6.0的枸櫞酸液修復(fù)液中,沸水浴20分鐘,停止加熱后自然冷卻20-30分鐘
7. 用PBS 3分鐘3次,組畫筆畫圈,滴加雙氧水,孵育20min
8. 用PBS 3分鐘3次,滴加封閉血清封閉1h
9.甩干 ,滴加適宜濃度的一抗置濕盒中4℃孵育過(guò)夜
10.用PBS 3分鐘×5次洗去一抗
11.甩干,滴加二抗室溫置孵育盒中孵育1小時(shí)(注意二抗種屬,夏季30min,冬季1h)
12.用PBS 3分鐘×5次洗去二抗
13.甩干,滴加DAB 顯色,水沖
14.蘇木素染核5min (新配置的蘇木素視情況而定)
15.流水沖洗多余的蘇木素,分化液中分化1秒
16.流水沖洗5min
17.梯度酒精復(fù)水:80%酒精5分鐘,95%酒精5分鐘,100%酒精5分鐘,100%酒精5分鐘,二甲苯Ⅱ透明5min,二甲苯Ⅰ透明5min(如為全透明,可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間)
18.用中性樹膠封片
19.鏡檢