D9088 DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒 質(zhì)粒提取

DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒 質(zhì)粒提取

NobleRyder D9088  DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒 DNA Extraction  Kit 

產(chǎn)品貨號(hào)：D9088

產(chǎn)品名稱：DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒 DNA Extraction Kit

英文名稱：DNA Extraction Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件：RT，復(fù)檢期1年                                             

NobleRyderD9088  DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和du特的緩沖液系統(tǒng)，從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段，同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)?？苫厥?00bp–10kb大小的片段，回收率大于80%(<100bp和>10kb 的DNA片段回收率為30－50%)。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

1、電泳時(shí)最好使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果，如下一步實(shí)驗(yàn)要求較高，則應(yīng)盡量使用TAE電泳緩沖液。

2、切膠時(shí)，紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短，以免對(duì)DNA造成損傷。

3、回收<100bp及>10kb的DNA片段時(shí)，應(yīng)加大溶膠液的體積，延長(zhǎng)吸附和洗脫的時(shí)間。

4、回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。

5、如非指明，所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

操作步驟（僅供參考）:

*使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。

1.瓊脂糖凝膠電泳后，將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分），放入干凈的離心管中，稱取重量。

2.向膠塊中加入 3 倍體積溶膠液（如果凝膠重為0.1g，其體積可視為 100μL，則加入 300μL溶膠液），50-55℃水浴放置10min，期間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，以確保膠塊充分溶解。

注意：溶膠時(shí)，如果溶膠液變?yōu)榧t色（正常情況下為淡黃色），可向含有 DNA 的膠溶液中加入10-30μL 3M 醋酸鈉（pH5.2）將膠溶液調(diào)為淡黃色，否則將會(huì)影響DNA與吸附柱的結(jié)合，影響回收效率。

3.將上一步所得溶液加入一個(gè)吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12000rpm離心30-60s，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。

注意：膠塊wan全溶解后最好將膠溶液溫度降至室溫再上柱，因?yàn)槲街谳^高溫度時(shí)結(jié)合DNA的能力較弱。

4.向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

5.向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

6.12000rpm 離心 2min，盡量除去漂洗液。將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，防止漂洗液中的乙醇影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

7.將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加適量經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置2min，12000rpm離心1min。

注意：

1)為了增加回收效率，可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中，12000rpm再次離心1min。

2)洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30μL，體積過(guò)小影響回收效率。

3)洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5之間。

8.DNA 產(chǎn)物-20℃保存。

DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒 質(zhì)粒提取

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D9088  DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒 DNA Extraction Kit  50T

D1198  DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒 DNA Extraction Kit  100T