美德聲利什曼原蟲 IgM 抗體檢測試劑盒

美德聲利什曼原蟲 IgM 抗體檢測試劑盒

美德聲利什曼原蟲 IgM 抗體檢測試劑盒是一種用于篩查內(nèi)臟利什曼病（VL）患者血清中 IgM 抗體的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒。內(nèi)臟利什曼病是一種由利什曼原蟲復(fù)合體（L. donovani）引起的嚴(yán)重疾病，具有較高的死亡率。該病主要通過沙蠅傳播，狗是主要的感染宿主。內(nèi)臟利什曼病在許多國家流行，尤其在發(fā)展中國家，隨著城市化進(jìn)程的加快，該病已成為一個嚴(yán)重的問題。該病在拉丁美洲、東非、中東、印度和中國部分地區(qū)發(fā)病率較高，地中海沿岸國家如意大利、法國南部、西班牙、葡萄牙和北非也有流行。在南歐，內(nèi)臟利什曼病已成為艾滋病患者的首要機(jī)會性感染疾病。

檢測原理

在初次孵育過程中，患者血清中的抗體與測試孔中的抗原結(jié)合。第二次孵育使抗原 - 抗體復(fù)合物與酶復(fù)合物結(jié)合。經(jīng)過洗滌去除未結(jié)合的酶后，加入顯色劑，在酶復(fù)合物和過氧化物的存在下產(chǎn)生藍(lán)色。終止液結(jié)束反應(yīng)，將藍(lán)色變?yōu)辄S色。

試劑組成

測試條：含有利什曼原蟲抗原的微孔板，共 96 個測試孔，置于測試條架中。

酶結(jié)合物：1 瓶，含 11 ml 抗人 IgM（μ 鏈）過氧化物酶（HRP），置于含有硫柳汞的穩(wěn)定緩沖液中。

陽性對照：1 瓶，含 2 ml 稀釋的替代陽性，置于含有硫柳汞的緩沖液中。

陰性對照：1 瓶，含 2 ml 稀釋的利什曼原蟲陰性人血清，置于含有硫柳汞的緩沖液中。

顯色劑：1 瓶，含 11 ml 四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。

洗滌濃縮液（20X）：2 瓶，每瓶含 25 ml 濃縮緩沖液和表面活性劑。

稀釋緩沖液：2 瓶，每瓶含 30 ml 緩沖蛋白溶液。

終止液：1 瓶，含 11 ml 1 M 磷酸。

樣本處理

將血液凝固后分離血清。如果樣本不立即使用，應(yīng)冷凍于 -20℃或更低溫度。避免樣本加熱滅活以及反復(fù)凍融。

結(jié)果解讀

# 分光光度計(jì)讀取

將酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)讀取器歸零于空氣中。使用 450 nm 和 620-650 nm 的濾光片進(jìn)行雙波長讀取所有微孔。陽性 - 吸光度讀數(shù)大于或等于 0.2 OD 單位。陰性 - 吸光度讀數(shù)小于 0.2 OD 單位。

# 視覺讀取

如果顏色變化明顯且顯著，樣本應(yīng)被解釋為陽性。

產(chǎn)品局限性

血清學(xué)結(jié)果應(yīng)作為診斷的輔助手段，不應(yīng)單獨(dú)解釋為診斷結(jié)果。盡管目前尚未記錄到特定的交叉反應(yīng)，但不能排除類似生物體的反應(yīng)。

質(zhì)量控制

使用陽性和陰性對照可輕松驗(yàn)證試劑盒的穩(wěn)定性。對于有效的測試，陽性對照必須超過 0.3 OD 單位，陰性對照必須低于 0.1 單位。如果這些值超出這些范圍，則不應(yīng)使用該試劑盒。

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