BN6013 中性轉(zhuǎn)化酶試劑盒 蔗糖
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BN6013
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/4/3 16:14:53
- 訪問次數(shù) 25
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
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貨號 | BN6013 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | NI 主要存在于細胞質(zhì)中,負責分解細胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖 |
中性轉(zhuǎn)化酶(Neutral invertase, NI)試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
中性轉(zhuǎn)化酶試劑盒 蔗糖
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:
蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr 分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。NI 主要存在于細胞質(zhì)中,負責分解細胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。
測定原理:
NI 催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在 510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi) 510nm 光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算 NI 活性
組成:
產(chǎn)品名稱 | BN6013-50T/24S | Storage |
提取液:液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 50ml | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑三:液體 | 30ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 25ml 試劑一充分溶解備用;用不完的試劑 4℃保存;
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提?。?/span>
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟和加樣表:
試劑名稱(μl) | 測定管 | 對照管 |
樣本 | 200 | 200 |
試劑一 | 800 |
混勻, 37℃準確水浴 30min 后,95℃水浴 10min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)
試劑三 | 500 | 500 |
混勻,95℃水浴 10min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻, 510nm 處蒸餾水調(diào)零,記錄各管吸光值A,如果吸光值大于 2,可以用蒸餾水稀釋后測定(計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)),ΔA=A 測定-A 對照。
NI 活性計算:
標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.0016x -0.001;x 為標準品濃度(μg/ml),y 為吸光值。
按蛋白濃度計算:
單位的定義:37℃每mg 蛋白每分鐘產(chǎn)生 1μg 還原糖定義為一個酶活性單位。
NI 活性(μg /min/mg prot)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷Cpr
按鮮重計算:
單位的定義:37℃每g 組織每分鐘產(chǎn)生 1μg 還原糖定義為一個酶活性單位。
NI 活性(μg /min/g 鮮重)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷W
V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.2ml;V2:加入提取液體積,1ml;T:反應(yīng)時間,30min; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g。
中性轉(zhuǎn)化酶試劑盒 蔗糖