BD6022 花青素還原酶試劑盒 抗氧系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BD6022
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/4/4 10:28:21
- 訪問次數(shù) 18
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
---|---|---|---|
貨號(hào) | BD6022 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 花青素還原酶試劑盒 |
花青素還原酶(anthocyanidin reductase,ANR)試劑盒說明書
微量法 100T/96S
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:
花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關(guān)鍵酶,在植物體內(nèi)起非常重要的調(diào)控作用,對(duì)花青素還原酶的調(diào)控機(jī)制研究有利于從基因水平改變植物的品質(zhì)。
測(cè)定原理:
花青素還原酶在 NADPH 存在的條件下作用于飛燕草色素轉(zhuǎn)變?yōu)楸頉]食子兒茶素和NADP,使反應(yīng)體系在 340nm 處的吸光值下降,吸光值下降速率反應(yīng)了花青素還原酶的活性。
花青素還原酶試劑盒 抗氧系列-常備現(xiàn)貨
組成:
產(chǎn)品名稱 | BD6022-100T/96S | Storage |
提取液:液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 20ml | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
試劑三:粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
試劑四:粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 1ml 蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 1ml 蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 1ml 蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
自備儀器和用品:
天平、研缽、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。
酶液提取:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2. 培養(yǎng)液等液體:直接檢測(cè)。
測(cè)定操作表:
試劑名稱 | 測(cè)定管 |
試劑一(μl) | 150 |
試劑二(μl) | 10 |
酶液(μl) | 20 |
試劑三(μl) | 10 |
試劑四(μl) | 10 |
充分混勻,于微量石英比色皿/96 孔板測(cè)定 340 處吸光值A1,然后在 40℃溫育 20min 后,再測(cè)定 340nm
處吸光值A2,△A=A1-A2
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1) 按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義:在 40℃,pH6.5 條件下,每毫克蛋白每分鐘催化 1nmolNADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR 活性(nmol/min/mg prot)= ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(V 樣×Cpr) ÷T
= 80.39×ΔA÷Cpr
(2) 按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義:在 40℃,pH6.5 條件下,每克組織每分鐘催化 1nmolNADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR 活性(nmol/min/g 鮮重)= ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T
= 80.39×ΔA÷W
(3) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在 40℃,pH6.5 條件下,每毫升液體每分鐘催化 1nmolNADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR 活性(nmol/min/ml)= ΔA÷(ε×d)×V 反總÷V 樣÷T
= 80.39×ΔA
V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.2ml;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm; V 樣:加入樣本體積,0.02ml;V 樣總:加入提取液體積,1ml;T:反應(yīng)時(shí)間,20min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g
b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1) 按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義:在 40℃,pH6.5 條件下,每毫克蛋白每分鐘催化 1nmolNADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR 活性(nmol/min/mg prot)= ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(V 樣×Cpr) ÷T
= 160.78×ΔA÷Cpr
(2) 按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義:在 40℃,pH6.5 條件下,每克組織每分鐘催化 1nmolNADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR 活性(nmol/min/g 鮮重)= ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T
= 160.78×ΔA÷W
(3) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在 40℃,pH6.5 條件下,每毫升液體每分鐘催化 1nmolNADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。
ANR 活性(nmol/min/ml)= ΔA÷(ε×d)×V 反總÷V 樣÷T
= 160.78×ΔA
V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.2ml;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,0.5cm; V 樣:加入樣本體積,0.02ml;V 樣總:加入提取液體積,1ml;T:反應(yīng)時(shí)間,20min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g