BE6014 乙醛脫氫酶試劑盒 輔酶Ⅰ系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BE6014
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/4/4 16:16:30
- 訪問次數(shù) 18
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BE6014 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 乙醛脫氫酶（acetaldehyde dehydrogenase,ALDH）試劑 |
乙醛脫氫酶（acetaldehyde dehydrogenase，ALDH）試劑盒說明書
微量法100T/96S
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種，廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內(nèi)，線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化，所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注；同時，乙醛脫氫酶在分子生物學以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應(yīng)用。
測定原理：
在輔酶Ⅰ存在的條件下，乙醛脫氫酶催化乙醛和 NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH，在 340nm 處的吸光值會增加，測定 340nm 處的吸光值變化，可計算得到乙醛脫氫酶的活性。
乙醛脫氫酶試劑盒 輔酶Ⅰ系列-常備現(xiàn)貨
組成：
產(chǎn)品名稱 | BE6014-100T/96S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 6ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 2ml | 4℃避光 |
試劑三：液體 | 1ml | 4℃避光 |
試劑四：液體 | 1ml | 4℃ |
試劑五：液體 | 1ml | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
自備儀器和用品：
天平、離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。
ALDH 提取:
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃，離心 20min。
2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
3. 液體：直接檢測。
測定操作表:
1、分光光度計/酶標儀預熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 340nm。
2、操作表
對照管 | 測定管 | |
樣本（µl） | 40 | |
試劑一（µl） | 60 | 60 |
試劑二（µl） | 20 | 20 |
試劑三（µl） | 10 | 10 |
試劑四（µl） | 10 | 10 |
試劑五（µl） | 10 | 10 |
H2O（µl） | 90 | 50 |
充分混勻，37℃，微量石英比色皿/96 孔板，對照管調(diào)零，于 340nm 處測定0s 與 60s 的吸光值A1 和A2，△A= A2-A1。 | ||
ALDH 酶活計算:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1） 按蛋白濃度計算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/mg prot）=
（2） 按樣本質(zhì)量計算
DA ×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T = 804×△A÷Cpr
e′ d
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/g 鮮重）=
（3） 按照細胞數(shù)量計算
DA ×V 反總÷（V 樣×W÷V 樣總）÷T= 804×△A÷W
e′ d
酶活定義：每 104 個細胞每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/104cell）=數(shù)量（萬個）
（4） 按液體體積計算
DA ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細胞數(shù)量（萬個））÷T= 804×△A÷細胞
e′ d
酶活定義：每ml 樣本每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/ml）=DA ×V 反總÷V 樣÷T= 804×△A e′ d
e：NADH 微摩爾消光系數(shù)，6.22×10-3 L/µmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.2ml； V 樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.04ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
（1） 按蛋白濃度計算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/mg prot）=
（2） 按樣本質(zhì)量計算
DA ×V 反總÷（V 樣×Crp）÷T = 1608×△A÷Cpr
e′ d
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/g 鮮重）=
（3） 按照細胞數(shù)量計算
DA ×V 反總÷（V 樣×W÷V 樣總）÷T = 1608×△A÷W e′ d
酶活定義：每 104 個細胞每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/104cell）=胞數(shù)量
（4） 按液體體積計算
DA ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細胞數(shù)量（萬個））÷T= 1608×△A÷細e′ d
酶活定義：每ml 樣本每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/ml）=DA ×V 反總÷V 樣÷T= 1608×△A e′ d
e：NADH 微摩爾消光系數(shù)，6.22×10-3 L/µmol/cm；d：96 孔板光徑，0.5cm；V 反總：反應(yīng)體系總體積， 0.2ml；V 樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.04ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml； W：樣本質(zhì)量，g
乙醛脫氫酶試劑盒 輔酶Ⅰ系列-常備現(xiàn)貨
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