BO6073 土壤羥胺還原酶試劑盒 土壤系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BO6073
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/4/4 16:51:03
- 訪問次數(shù) 13
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
---|---|---|---|
貨號(hào) | BO6073 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨 |
土壤羥胺還原酶(hydroxylamine reductase,HR)試劑盒說明書
微量法 100T/48S
土壤羥胺還原酶試劑盒 土壤系列
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:
土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強(qiáng)弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。
測定原理:
硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮?dú)猓陨肀贿€原為 Fe2+,F(xiàn)e2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在 510nm 處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm 處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。
試劑組成和配制:
產(chǎn)品名稱 | BO6073-100T/48S | Storage |
試劑一:液體 | 4ml | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑三:液體 | 12ml | 4℃ |
試劑四:液體 | 8ml | 4℃ |
試劑五:液體 | 4ml | 4℃ |
試劑六:液體 | 2ml | 4℃避光 |
試劑七:液體 | 2ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加 4ml 蒸餾水充分溶解。
自備儀器和用品:
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀、氮吹儀。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干,過 30~50 目篩。
測定操作表:
空白管 | 對(duì)照管 | 測定管 |
風(fēng)干土樣(g) | 0.02 | 0.02 | |||
試劑一(μl) | 40 | 40 | |||
蒸餾水(μl) | 40 | ||||
試劑二(μl) | 40 | 40 | 40 | ||
混勻后,用N2 氣流排除管中空氣,立即密封,于 30℃反應(yīng) 1h | |||||
試劑四(μl) | 80 | 80 | 80 | ||
充分震蕩 10min,8000rpm,25℃,離心 10min | |||||
上清液(μl) | 20 | 20 | 20 | ||
試劑五(μl) | 40 | 40 | 40 | ||
試劑六(μl) | 20 | 20 | 20 | ||
試劑七(μl) | 20 | 20 | 20 | ||
蒸餾水(μl) | 100 | 100 | 100 | ||
充分混勻,25℃靜置顯色 10min,用蒸餾水調(diào)零,于微量石英比色皿/96 孔板測定 510nm 各管吸光值,分別記為A 空白管、A 標(biāo)準(zhǔn)管、A 對(duì)照管、A 測定管,△A=A 空白管- (A 測定管-A 對(duì)照管)。 |
計(jì)算公式:
使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.185x -0.1828,R2 = 0.9992
酶活定義:每克土壤每天轉(zhuǎn)化 1μg 羥胺為一個(gè)酶活力單位。
HR 活性(μg/d /g 土樣)=(△A+ 0.1828)÷ 0.185×V 反總÷W÷T
= 36.32×(△A+0.1828)÷W
使用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.0925x -0.1828,R2 = 0.9992
酶活定義:每克土壤每天轉(zhuǎn)化 1μg 羥胺為一個(gè)酶活力單位。
HR 活性(μg/d /g 土樣)=(△A+ 0.1828)÷ 0.0925×V 反總÷W÷T
=72.64×(△A+0.1828)÷W
V 反總:加入提取液體積,0.28ml;W:樣本質(zhì)量,g;T:1/24h
注意事項(xiàng):
土壤表層溶解氧濃度較大,取樣應(yīng)取表層 5cm 以下的土壤,否則酶活性較低或者測定不到。
試劑三盡量不要敞口放置,取完立即加蓋擰緊。
反應(yīng)體系最好能用氮吹儀排除溶解氧,若無此裝置,則加入試劑三后立即密封,于 30℃反應(yīng) 1h。
土壤羥胺還原酶試劑盒 土壤系列