人直腸黏膜上皮原代細(xì)胞
| 參考價(jià) | ￥1-￥580/件 |
- 公司名稱(chēng) 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌上研生
- 型號(hào)
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間2025/5/15 11:30:09
- 訪問(wèn)次數(shù) 12
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PCR檢測(cè)試劑盒、PCR試劑盒， 核酸檢測(cè)試劑盒，熒光定量檢測(cè)試劑盒，生化試劑盒 ，比色法試劑盒，酶活性檢測(cè)試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測(cè)試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷(xiāo)售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司公司產(chǎn)品。
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-01X7164 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人直腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人直腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人直腸黏膜上皮原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 直腸組織 |
英文名稱(chēng) | Human Rectal Mucosal Epithelial Cells | 貨號(hào) | YS-01X7164 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人直腸黏膜上皮細(xì)胞分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過(guò)盆膈，下端以門(mén)而終。直腸上端的大小似結(jié)腸，其下端擴(kuò)大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細(xì)接管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周?chē)嘀?、無(wú)縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來(lái)自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈，來(lái)自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來(lái)自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
Eca-109細(xì)胞，人食管癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞,SF126細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 | GSK(Mouse glycogen synthase kinase) ELISA KIT 小鼠糖原合成酶激酶 96T |
RASSF3： Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PXMP1/ABCD3 過(guò)氧化物酶膜蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HDAC10/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?；?span>10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C17orf64： 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框64抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRCA2 癌易感基因2抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-CXCL4/PF-4/FITC 熒光素標(biāo)記血小板因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
胰腺衍生因子抗體 Anti-FAM3B/PANDER 0.1ml | ADH6： 乙醇脫氫酶6抗體 0.2ml |
CA46(人Butts淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝 |
rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞 A4細(xì)胞 HL-7702(肝細(xì)胞) | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480] |
大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 |
CM-M069小鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | CL-0100HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
NUGC-3人胃癌細(xì)胞 Human gasic cancer cells NUGC-3 1640+10% FBS | 人直腸黏膜上皮原代細(xì)胞C17orf64： 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框64抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細(xì)胞;GL-37 | 雜交瘤(B類(lèi));Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
NHDF-c 正常人皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF)來(lái)自少年者 x500,000cells 氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
大鼠元細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRO Alpha/GRO-1/CXCL1 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因-1抗體GROa GROβ 規(guī)格 0.1ml | 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2B |
Phospho-FAK(Tyr576 + Tyr577)： 0酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml | Anti-LTB4-R1 白三烯B4受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白αMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | CA46(人Butts淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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