美谷分子儀器(上海)有限公司
利用高內(nèi)涵3D成像及分析,肺類器官可作為體外毒性評(píng)價(jià)的分析模型
檢測(cè)樣品:細(xì)胞
檢測(cè)項(xiàng)目:高內(nèi)涵3D成像及分析
方案概述:類器官模型因其能夠再現(xiàn)真實(shí)組織的復(fù)雜性而在生物研究和篩選中越來(lái)越受歡迎。為了模擬體內(nèi)的人體肺器官,我們?cè)谟兄?3D 結(jié)構(gòu)形成的條件下培養(yǎng)了原代人肺上皮細(xì)胞,重現(xiàn)了肺氣道形態(tài)和功能上的特征。在肺類器官 培養(yǎng)中,上皮干細(xì)胞和祖細(xì)胞在添加了一系列生長(zhǎng)因子的 ECM 中培養(yǎng)。
類器官模型因其能夠再現(xiàn)真實(shí)組織的復(fù)雜性而在生物研究和篩選中越來(lái)越受歡迎。為了模擬體內(nèi)的人體肺器官,我們?cè)谟兄?3D 結(jié)構(gòu)形成的條件下培養(yǎng)了原代人肺上皮細(xì)胞,重現(xiàn)了肺氣道形態(tài)和功能上的特征。在肺類器官 培養(yǎng)中,上皮干細(xì)胞和祖細(xì)胞在添加了一系列生長(zhǎng)因子的 ECM 中培養(yǎng)。類器官隨后生長(zhǎng)成復(fù)雜的結(jié)構(gòu),保留了多系上皮細(xì)胞簇。這些特性使類器官培養(yǎng)成為一種富有前景的手段,可以廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)和轉(zhuǎn)化方法,如藥物篩 選和疾病建模。 這里我們闡述了一種高內(nèi)涵成像方法,可以監(jiān)測(cè)和可視化肺類器官的生長(zhǎng)和分化,3D 結(jié)構(gòu)的重建,類器官結(jié)構(gòu)的復(fù)雜分析,細(xì)胞形態(tài)和活力,以及不同細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)。3D 肺類器官植入在 Matrigel domes。發(fā)育中的類 器官包括具有復(fù)雜形態(tài)的球形物體,包括腔和膀胱結(jié)構(gòu)。在 8 周的生長(zhǎng)過(guò)程中,我們監(jiān)測(cè)到了大小和復(fù)雜性的增加。用透射光監(jiān)測(cè)類器官,然后用 20-30 層 Z 軸掃描透過(guò)基質(zhì)凝膠對(duì)染色的類器官成像,物鏡倍數(shù)為 10 – 40x。使用 ImageXpress® Confocal HT.ai 智能化共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)新配置的激光光源顯著的提高照明強(qiáng)度,從而顯著提高了亮度、檢測(cè)靈敏度和成像速度。
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