青島盛瀚色譜技術(shù)有限公司
褐藻膠寡糖中的甘露糖醛酸單糖和古羅糖醛酸單糖含量的測(cè)定
檢測(cè)樣品:褐藻膠寡糖
檢測(cè)項(xiàng)目:甘露糖醛酸單糖 古羅糖醛酸單糖
方案概述:在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域,褐藻膠寡糖可作為糖尿病、肥胖癥、直腸結(jié)腸癌、習(xí)慣性便秘患者的療效食品;在飼料領(lǐng)域,褐藻寡糖克服了以往所有抗生素、益生素、酶制劑等的不足,用量少、天然、無(wú)殘留且穩(wěn)定性強(qiáng),并能提高動(dòng)物機(jī)體的抗病能力,促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),增加動(dòng)物營(yíng)養(yǎng),是優(yōu)良的飼料添加劑。
褐藻膠寡糖具有多種生物學(xué)功能,有整腸和解毒、降血糖血脂、抗凝血、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用。
在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域,褐藻膠寡糖可作為糖尿病、肥胖癥、直腸結(jié)腸癌、習(xí)慣性便秘患者的療效食品;在飼料領(lǐng)域,褐藻寡糖克服了以往所有抗生素、益生素、酶制劑等的不足,用量少、天然、無(wú)殘留且穩(wěn)定性強(qiáng),并能提高動(dòng)物機(jī)體的抗病能力,促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),增加動(dòng)物營(yíng)養(yǎng),是優(yōu)良的飼料添加劑。
褐藻膠是由1,4-甘露糖醛酸 (M)和1,4-古羅糖醛酸(G)不規(guī)則鏈接起來(lái)的線性長(zhǎng)鏈分子,采用不同的降解方法(酸降解法,酶降解法,氧化降解法)降解褐藻膠,可以得到聚合度20以下的系列褐藻膠寡糖,由β-D-聚甘露糖醛酸(M)和α-L-聚古羅糖醛酸(G)組成的線型低聚合物,有聚甘露糖醛酸(PM)、聚古羅糖醛酸(PG)和雜合褐藻寡糖(PMG)三種類型產(chǎn)品。
褐藻膠寡糖是一種淡黃褐色粉末,能溶于水,穩(wěn)定性強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)中使用具有脈沖安培檢測(cè)器的高效陰離子交換色譜對(duì)褐藻膠寡糖中的甘露糖醛酸單糖和古羅糖醛酸單糖進(jìn)行檢測(cè)。詳情如下:
儀器和設(shè)備
表1 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所使用的儀器設(shè)備
試劑和材料
除非另有說(shuō)明,所用試劑均為優(yōu)級(jí)純。
水:超純水(18.2MΩ•cm);
50%氫氧化鈉:色譜純;
無(wú)水乙酸鈉:優(yōu)級(jí)純。
古羅糖醛酸單糖(客戶提供):2mmol/L;
甘露糖醛酸單糖(客戶提供):2mmol/L。
樣品的制備
精密稱取褐藻膠G段寡糖0.1088g,用超純水溶解稀釋定容到100mL,經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾,直接進(jìn)樣分析。
精密稱取褐藻膠寡糖0.1049g,用超純水溶解稀釋定容到100mL,經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾,直接進(jìn)樣分析。
將古羅糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品(客戶提供)稀釋20倍,直接進(jìn)樣分析。
將甘露糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品(客戶提供)稀釋20倍,直接進(jìn)樣分析。
分析步驟
色譜條件
流動(dòng)相:
溶劑A:超純水;
溶劑B:250mM氫氧化鈉;
溶劑C:250mM氫氧化鈉+500mM乙酸鈉水溶液。
表2 淋洗液梯度變化表
流 速:0.5mL/min;
柱 溫:30℃;
進(jìn)樣量:25μL;
色譜柱:Dionex CarboPac PA20 Analytical色譜柱,150 mm×3mm,配Dionex CarboPac PA20 Guard保護(hù)柱30 mm×3 mm。
電化學(xué)檢測(cè)器參數(shù)
模式:脈沖安培;檢測(cè)頻率:2Hz;反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)Ts=200ms;Flexcell金電極。
表3 檢測(cè)器波形設(shè)置
衰減200μA;濾波器0.050Hz
標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖
0.1mmol/L古羅糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖
0.1mmol/L甘露糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖
空白色譜圖
空白試樣的色譜圖
樣品測(cè)定
褐藻膠G段寡糖色譜圖
褐藻膠寡糖色譜圖
結(jié)果與計(jì)算
表4 檢測(cè)結(jié)果(含量%)
備注:①ND表明未檢出或低于檢出限;②測(cè)定值已扣除空白值;③不同方法、不同實(shí)驗(yàn)室間檢測(cè)結(jié)果會(huì)存在差異。
相關(guān)產(chǎn)品清單
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