匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司
IPHASE/匯智和源 微核試驗檢測方法—流式細(xì)胞術(shù)
檢測樣品:流式細(xì)胞術(shù) 微核試驗 微核 衛(wèi)星核 MCN
檢測項目:流式細(xì)胞術(shù) 微核試驗 微核 衛(wèi)星核 MCN
方案概述:?微核(micronucleus,簡稱MCN),也叫衛(wèi)星核,是真核生物細(xì)胞在有絲分裂后期由于染色體片斷喪失著絲粒從而游離于細(xì)胞質(zhì)中的一種異常結(jié)構(gòu),是染色體畸變的一種表現(xiàn)形式。微核是細(xì)胞有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時,仍留在細(xì)胞質(zhì)中的整條染色單體或染色體的無著絲粒斷片或環(huán)。
微核(micronucleus,簡稱MCN),也叫衛(wèi)星核,是真核生物細(xì)胞在有絲分裂后期由于染色體片斷喪失著絲粒從而游離于細(xì)胞質(zhì)中的一種異常結(jié)構(gòu),是染色體畸變的一種表現(xiàn)形式。微核是細(xì)胞有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時,仍留在細(xì)胞質(zhì)中的整條染色單體或染色體的無著絲粒斷片或環(huán)。這些片段或染色體在分裂末期不能進(jìn)入主核,在子細(xì)胞進(jìn)入下一次分裂間期時,便濃縮成主核之外的小核,即微核。目前有輻射、化學(xué)誘變劑等較多理化因素可引起染色體斷裂,且均可導(dǎo)致細(xì)胞分裂從而產(chǎn)生微核現(xiàn)象。
一、 微核試驗的簡介
微核試驗是一種建立在細(xì)胞水平上分析DNA損傷的技術(shù),其目的是以微核作為遺傳毒性檢測終點(diǎn),用于檢測染色體斷裂劑及非整倍體誘導(dǎo)劑,是目前公--認(rèn)的篩選致突變物的主要方法之一,在化合物遺傳毒性評價系統(tǒng)中占據(jù)著重要的地位。
陰性對照
陽性對照
微核試驗可分為體外微核及體內(nèi)微核試驗,體外微核試驗常以CHL、V79及CHO-K1細(xì)胞作為試驗系統(tǒng),而體內(nèi)微核試驗使用較多的是嚙齒類動物的嗜多染紅細(xì)胞(PCE)或者網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)。PCE或RET是有絲分裂后期的紅細(xì)胞由幼年發(fā)展為成熟紅細(xì)胞過程中的一個階段,此時紅細(xì)胞的主核已排出,而微核仍保留在細(xì)胞質(zhì)中并十分易于辨認(rèn)。因此,嗜多染紅細(xì)胞或網(wǎng)織紅細(xì)胞是體內(nèi)微核試驗的首-選細(xì)胞群。
圖片來源:小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核的形成(Cole et al,1979,1981)
二、 流式體內(nèi)微核檢測
除了人工閱片等常規(guī)檢測方法外,流式細(xì)胞術(shù)等自動化檢測方法也被用于微核檢測。流式細(xì)胞術(shù)(Flow cytometry)檢測方法是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的定量測定細(xì)胞和亞細(xì)胞成分的方法。該方法通過流式細(xì)胞儀以激光束為光源,將待測樣品進(jìn)行熒光染色,然后在液體載體里將單個細(xì)胞通過激光束產(chǎn)生的熒光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?,最終通過儀表顯示來達(dá)到定量測定的目的。
利用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行體內(nèi)微核鑒定則是由于與成熟的紅細(xì)胞相比,未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞仍然含有RNA和某些表面蛋白質(zhì)(比如轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,也稱為CD71),因此可用RNase降解RNA以排除RNA的干擾,且不同抗體可用于區(qū)分不同細(xì)胞或成分,如CD71抗體可區(qū)分網(wǎng)織紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞,CD61抗體可用于排除血小板的干擾,而后可用PI染液對DNA進(jìn)行染色,從而輕易鑒別出微核。流式體內(nèi)微核檢測流程如下:
三、IPHASE相關(guān)產(chǎn)品
流式細(xì)胞術(shù)微核檢測具有檢測速度快、結(jié)果客觀可靠及可滿足高通量檢測要求等特點(diǎn),因此,IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者,憑借先進(jìn)的設(shè)備,專業(yè)的技術(shù)人員和多年研發(fā)的經(jīng)驗,現(xiàn)正在開發(fā)小鼠體內(nèi)微核試驗流式檢測試劑盒。小鼠染毒處理后,于不同時間點(diǎn)收集外周血,便可用該試劑盒進(jìn)行流式微核檢測。試劑盒提供了用于小鼠外周血流式微核檢測的主要試劑,包括抗凝劑、RNase溶液、CD71、CD61熒光抗體、生物標(biāo)準(zhǔn)品及PI染液等,且試劑盒各組成成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測,實驗結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性好。
與體內(nèi)微核檢測試驗一樣,體外微核檢測在預(yù)測致癌危險性、檢測非整倍體誘發(fā)劑及其它遺傳危害方面也具有重要的地位。IPHASE現(xiàn)已開發(fā)出了包括采用人工閱片方法的體外微核試驗試劑盒在內(nèi)的一系列專門用于體外遺傳毒性研究的產(chǎn)品,助力廣大客戶進(jìn)行體外遺傳毒理學(xué)研究。
名稱 | 規(guī)格 |
體外微核試驗試劑盒 | 5mL*32 test |
遺傳毒性Ames試劑盒 | 100/150/200/250 dishes |
遺傳毒性Mini-Ames試劑盒 | 6孔板*24板/6孔板*40板 |
微量波動Ames試劑盒 | 16*96 wells/ 4*384 wells |
UMU遺傳毒性試劑盒 | 96 wells |
TK基因突變試劑盒 | 20ml*36 test |
HGPRT基因突變試劑盒 | 20ml*36 test |
體外染色體畸變試劑盒 | 5mL*30 test |
彗星試驗試劑盒 | 20/50 test |
便捷性
省去誘導(dǎo)S9制備、試劑配制的時間,大大縮短了實驗周期。
準(zhǔn)確性
試劑盒各成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測,實驗結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性高。
穩(wěn)定性
試劑盒穩(wěn)定性強(qiáng)、易于運(yùn)輸和保存。
應(yīng)用廣
應(yīng)用范圍廣,可用于食品、藥品、化妝品、化學(xué)品、醫(yī)療器械、農(nóng)藥等的遺傳毒性研究。
IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗,推出了多領(lǐng)域、多種類的高-端科研試劑,為藥物早期研發(fā)提供篩選工具,為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段,為食品、藥品、化學(xué)品等的遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品,望廣大科研工作者咨詢。
發(fā) 文 章 得 獎 勵
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非SCI論文及IF≤5分,500元禮品;
5分<IF≤8分 800元;
8分<IF≤10分 1000元;
IF≥10分 2000元;
注:禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購買抵用券;
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