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色譜類型分析
閱讀：3187發(fā)布時間：2019-11-23
色譜是一種技術(shù)，通過該技術(shù)，樣品中的組分載入液相或氣相中，通過在固定相上由吸附—解吸附來完成。
一、 液相色譜 (HPLC)
HPLC分離是基于在樣品在流動相液體和固定相之間的不同分配。一般地說HPLC大體分為以下幾種(未考慮其重要性順序)
1. 手性液相色譜
分離光學異構(gòu)體可在手性固定相上，用衍生化試劑或在非手性固定相上用流動相添加劑形成非對對映體來實現(xiàn)。用作雜質(zhì)試驗方法時，如果光學異構(gòu)體雜質(zhì)在光學異構(gòu)體藥物之前洗脫,要增加靈敏度。
2. 離子交換色譜
分離基于荷電功能團，樣品負離子(X - )為陰離子，樣品正離子((X + )為陽離子，一般用pH程序洗脫。
3. 離子對/親和色譜
分離基于與目標樣品的專一的化學相互作用。更普遍的反相型用緩沖液和加入的對離子(與被分離的樣品荷相反電荷)分離。分離受pH、離子強度、溫度、濃度和共存的有機溶劑類型的影響。親和色譜，一般用于大分子,使用配合體(共價結(jié)合在固體基質(zhì)上的生物活性分子)，與其同類的抗原(分析介質(zhì))反應(yīng)，生成可逆轉(zhuǎn)的復(fù)合物,通過改變緩沖條件洗脫。
4. 正相色譜
正相色譜為用有機溶劑為流動相和極性的固定相。此時較小極性的組分比較大極性組分更快地洗脫。
5. 反相色譜
反相色譜,一種鍵合相的色譜技術(shù)，用水作基本溶劑,選擇性也受溶劑強度、柱溫和pH的影響，一般來說較大極性比較小極性組分洗脫更快。
6. 排阻色譜
也叫凝膠滲漉(permeation)或濾過,分離基于化合物分子大小或水動力學(hydrodynamic)容積。比多孔柱填料孔徑大得多的分子先洗脫，小分子進入孔隙洗脫晚，其余的洗脫速率取決于其分子的相對大小。
二、 氣相色譜(GC)
氣相色譜基于揮發(fā)性樣品由作為流動相的載氣運載，通過色譜柱內(nèi)的固定相時發(fā)生吸附和解吸附過程進行分離。
通常氣相色譜分析的樣品是低分子量化合物，這些化合物是易揮發(fā)的和高溫時穩(wěn)定的。在這一方面，藥物和藥物制劑中的殘留溶劑適于氣相色譜分析。生成化學衍生物可達到易揮發(fā)和熱穩(wěn)定的目的。
三、 薄層色譜(TLC)
薄層色譜是一種簡便普通的色譜技術(shù)，分離基于在一端浸于溶劑混合物(流動相)中的薄層板(固定相)上點的樣品移動進行分離，整個系統(tǒng)在密封的缸中進行。
三種方法，氣相、液相和薄層中，薄層色譜是普通的試驗方法，因為薄層板上所有的組分都可用適宜的檢測技術(shù)檢出。然而通常不如HPLC那么準確和靈敏。雖然選用適宜的檢測技術(shù)，TLC法能見到分析的“全圖”(whole picture) ，但比HPLC分析變異較大。
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