液相色譜儀分離茶多酚實(shí)驗(yàn)方法研究

用液相色譜儀1200可以分離檢測(cè)茶多酚含量的方法研究？舜星科技為你提供資料如下：

HPLC法具有樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單、色譜柱選擇范圍寬、流動(dòng)相種類及比例可任意變化、分析時(shí)間較短、檢測(cè)方式多樣等優(yōu)點(diǎn)。1976年，H~fler和 Coggon將 HPLC法用于兒茶素的分析。他們使用丙酮 ／水混合液對(duì)綠茶進(jìn)行預(yù)處理，所使用的流動(dòng)相為乙酸 ／甲醇 ，N，N二甲基甲酞胺 ／水 （體積比 1：2：40：157），色譜柱為  Bondapak Cl8（10 m，30cm×4mm id．），280nm紫外檢測(cè) ，35rain內(nèi)分離了 EGC，C，EC，EGCG，ECG和咖啡因。此后，HPLC法不斷得到改進(jìn)。Goto等采用水 ／己腈 ／磷酸體系通過(guò)兩步線性梯度洗脫分析兒茶素，盡管該法流動(dòng)相和梯度洗脫都比較復(fù)雜。并且柱溫對(duì)分離的影響也很大，但可以在 20min內(nèi)成功分離 8種兒茶素和咖啡因，檢出限達(dá) 0．2ng。Dalluge等系統(tǒng)地研究了流動(dòng)相組成和柱溫對(duì)綠茶中六種主要兒茶素和咖啡因的影響。

重點(diǎn)討論了色譜效率及兩對(duì)異構(gòu)體 （GCG／EGCG和C／EC）的基線分離，以保證準(zhǔn)確的定量分析 ，指出含酸流動(dòng)相與去活化單體 c。 柱的聯(lián)合使用可顯著提高色譜分離效率。Lin等采用等度洗脫和梯度洗脫兩種方式分析茶葉，其等度洗脫的流動(dòng)相為甲醇／水／甲酸 （體積比為9．5：8O．2：0．3），在 60min內(nèi)分離 了 EGC，C，EGCG，EC，（ G和 ECG等6種兒茶素，檢測(cè)靈敏度達(dá)到 1．5mg／L。梯度洗脫的流動(dòng)相A為甲醇／甲酸／水 （體積比為20：0-3：79．7），B為甲醇／甲酸 （體積比為99．7：0-3），梯度為 100％A（0-10min）．100％ A一90％ A （11-15rain），90％ A一70％ A （16—35min）．70％ A （36—50min），在 36min內(nèi)檢  EGC，C，EGCG，EC，f：cc，ECG和CG等7種兒茶素。他們比較了等度洗脫與梯度洗脫兩種方法后認(rèn)為：南于梯度洗脫后需要用流動(dòng)相將柱子恢復(fù)到更初的平衡狀態(tài)，雖然其洗脫能力強(qiáng)，但其總計(jì)花費(fèi)的時(shí)間更多；而等度洗脫操作更方便，更適合于系統(tǒng)地分析各類茶葉。

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