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實(shí)驗(yàn)
脂質(zhì)體在 Avanti Polar 采購(gòu),根據(jù)供應(yīng)商指導(dǎo)制備。
一個(gè)脂質(zhì)體樣品(0.5 mg/mL)用 HEPES 緩沖液(25 mM)制備。DLS 每小時(shí)測(cè)試一次共 15 小時(shí)。測(cè)試角度 175°、溫度 25℃。樣品每次測(cè)試前進(jìn)行平衡。
一個(gè)脂質(zhì)體樣品(0.5 mg/mL)用 HEPES 緩沖液(25 mM)制備。DLS 從 10℃到 80℃,每 10℃測(cè)試一次共 9 個(gè)溫度。測(cè)試角度是 175°,每次測(cè)試前樣品平衡 10 分鐘。
脂質(zhì)體樣品(0.5 mg/mL)用 HEPES 緩沖液(5,10,15,20和25 mM)制備成五個(gè)濃度。試角度 175°、溫度 25℃,樣品每次測(cè)試前進(jìn)行平衡。
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測(cè)試結(jié)果
DLS 時(shí)間系列結(jié)果如圖上圖所示。脂質(zhì)體隨著時(shí)間變化,粒度變化小,表明結(jié)果有很高的精度。經(jīng)過 15 小時(shí)的 15 個(gè)測(cè)試平均半徑是 85.1±0.7 nm。所有測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)偏差僅為 0.8 %。而且,觀察到所有測(cè)試是單一分布,表明只有單層脂質(zhì)體存在,在整個(gè)測(cè)試中沒有明顯的團(tuán)聚。
DLS 溫度系列如圖上圖所示。數(shù)據(jù)表明,從 25℃開始隨著溫度增加觀察到一個(gè)輕微而持續(xù)增大的粒度。
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結(jié)論
Litesizer 500 用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)試脂質(zhì)體粒度分布隨著時(shí)間、溫度和濃度的系列變化。結(jié)果表明測(cè)試有高度的精確性和準(zhǔn)確性。
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