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酶聯(lián)免疫吸附法

時間：2020/3/11閱讀：912
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原理：可用于測定抗體，也可用于檢測杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反響將待測物與酶連接，然后通過酶與底物發(fā)生顏色反響，用于定量測定。酶聯(lián)免疫吸附法測定的對象可所以抗體也可所以抗原。3種必要的試劑： 

①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）； 

②酶符號的抗原或抗體（符號物）； 
③酶效果的底物（顯色劑）。

ELISA進程包括：抗原吸附在固相載體上，這個進程稱為包被，加待測抗體, 再加相應酶符號抗體，生成抗原--待測抗體--酶符號抗體的復合物，再與該酶的底物反響生成有色產(chǎn)品。借助分光光度計的光吸收核算抗體的量。

依據(jù)檢測意圖和操作過程不同，有以下三種類型的常用辦法：

a、間接法  

此法是測定抗體zui常用的辦法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標本（含相應抗體）與之結合。洗刷后，加人酶標抗球蛋白抗體（酶標抗抗體）和底物進行測定。

b、雙抗體夾心法  

酶聯(lián)免疫吸附法此法常用于測定抗原。將已知抗體吸附于固相載體，加人待檢標本（含相應抗原）與之結合。溫育后洗刷，加人酶標板中。

c、競爭法  

此法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，將特異性抗體吸附于固相載體。參加待測抗原和一定量的酶標已知抗原，使二者竟爭與固相抗體結合；通過洗刷分離，zui后結合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關

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