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中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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電泳緩沖液的特點(diǎn)是什么？

時(shí)間：2024/7/8閱讀：393
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電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個(gè)重要組成， 是電泳場(chǎng)中的導(dǎo)體，也是維持電泳系統(tǒng)恒定 pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。

電泳緩沖液的特點(diǎn)：
1.TAE是使用廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量(TBE中電泳時(shí)測(cè)出的相對(duì)分子質(zhì)量會(huì)大于實(shí)際分子質(zhì)量)，且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時(shí)也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小，長(zhǎng)時(shí)間電泳(如過夜)不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。

2.TBE的特點(diǎn)是緩沖能力強(qiáng)，長(zhǎng)時(shí)間電泳時(shí)可選用TBE，并且當(dāng)用于電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果更好。TBE用于瓊脂糖凝膠時(shí)易造成高電滲作用，并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價(jià)結(jié)合的四羥基硼/酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收電泳中使用。

3.TPE的緩沖能力也較強(qiáng)，但由于磷酸鹽易在乙醇沉淀過程中析出，所以也不宜在回收DNA片段的電泳中使用。

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