超微量分光光度計(jì)的工作原理與應(yīng)用技巧

閱讀：427 發(fā)布時(shí)間：2025-9-8

　　超微量分光光度計(jì)基于物質(zhì)對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸收特性進(jìn)行定量分析，核心原理是當(dāng)光線通過(guò)待測(cè)樣品時(shí)，其中的核酸、蛋白質(zhì)等分子會(huì)選擇性吸收特定波長(zhǎng)的光，未被吸收的光被檢測(cè)器接收并轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，通過(guò)朗伯-比爾定律計(jì)算樣品濃度。與傳統(tǒng)分光光度計(jì)相比，其創(chuàng)新點(diǎn)在于采用特殊光路設(shè)計(jì)，僅需微量樣品即可完成檢測(cè)，避免了傳統(tǒng)方法因稀釋或加樣量過(guò)多導(dǎo)致的誤差。

　　一、該儀器的工作流程圍繞光路系統(tǒng)與檢測(cè)模塊展開：

　　光源發(fā)射穩(wěn)定光線，經(jīng)過(guò)光學(xué)元件聚焦后射入樣品池，樣品中的目標(biāo)分子吸收特定波長(zhǎng)的能量，剩余透射光被高靈敏度檢測(cè)器捕獲。儀器通過(guò)對(duì)比空白對(duì)照與樣品的吸光度差異，自動(dòng)計(jì)算并顯示濃度值，部分設(shè)備還能同步評(píng)估樣品純度。

　　二、應(yīng)用中需掌握以下關(guān)鍵技巧：

　　??樣品制備??需確保樣品純凈無(wú)顆粒雜質(zhì)，懸浮顆粒會(huì)散射光線導(dǎo)致吸光度異常升高，檢測(cè)前可短暫離心去除沉淀；??加樣規(guī)范??使用配套的樣品臺(tái)或芯片時(shí)，需將微量液體均勻覆蓋檢測(cè)區(qū)域，避免氣泡或液體不足影響光路傳輸；??空白對(duì)照設(shè)置??每次檢測(cè)前需用與樣品同源的緩沖液作為參比，校正背景干擾；??結(jié)果解讀??除濃度數(shù)值外，需結(jié)合純度指標(biāo)判斷樣品質(zhì)量。

　　此外，檢測(cè)不同類型分子時(shí)需切換對(duì)應(yīng)光源模式，并避免反復(fù)使用同一檢測(cè)區(qū)域?qū)е陆徊嫖廴尽Ｍㄟ^(guò)規(guī)范操作與結(jié)果綜合分析，超微量分光光度計(jì)可在核酸提取、蛋白定量等實(shí)驗(yàn)中快速提供可靠數(shù)據(jù)，提升實(shí)驗(yàn)效率。

超微量分光光度計(jì)的工作原理與應(yīng)用技巧

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