廈門(mén)慧嘉生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

18906011628

ELISPOT 技術(shù)簡(jiǎn)介

時(shí)間:2009/8/2閱讀:1113
分享:

ELISPOT 技術(shù)簡(jiǎn)介

 

  隨著酶聯(lián)免疫分析技術(shù)在醫(yī)學(xué)及生物學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用 , 使體外檢測(cè)各種細(xì)胞因子及抗體研究有了新的突破。在研究免疫應(yīng)答機(jī)制時(shí)以往常用用酶聯(lián)免疫吸附法( ELISA )檢測(cè)體液中游離的細(xì)胞因子( CK )或抗體,但由于游離的循環(huán)抗體或 CK 的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合,而不能確切的反映體內(nèi)的抗體及 CK 的水平。 80 年代,國(guó)外的科研工作者根據(jù) ELISA 技術(shù)的基本原理,建立了體外檢測(cè)特異性抗體分泌細(xì)胞和 CK 分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)( ELISPOT )。因其具有較高的特異性和敏感性,目前正被國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用,對(duì)探索自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制具有重要意義。

  ELISPOT 法源自 ELISA ,又突破傳統(tǒng) ELISA 法,是定量 ELISA 技術(shù)的延伸和新的發(fā)展。兩者都是檢測(cè)細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子或其他可溶性蛋白,它們zui大的不同在于:

n         ELISA 通過(guò)顯色反應(yīng),在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較得出可溶性蛋白總量。

n         ELISPOT 也是通過(guò)顯色反應(yīng),在細(xì)胞分泌這種可溶性蛋白的相應(yīng)位置上顯現(xiàn)清晰可辨的斑點(diǎn),可直接在顯微鏡下人工計(jì)數(shù)斑點(diǎn)或通過(guò) CTL 公司的 ELISPOT 分析系統(tǒng)對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行計(jì)數(shù), 1 個(gè)斑點(diǎn)代表 1 個(gè)細(xì)胞,從而計(jì)算出分泌該蛋白的細(xì)胞的頻率。(某些研究不僅要測(cè)細(xì)胞因子生成量,還需檢測(cè)分泌此細(xì)胞因子的細(xì)胞頻率)

n         由于是單細(xì)胞水平檢測(cè), ELISPOT ELISA 和有限稀釋法等更靈敏,能從 20 萬(wàn) -30 萬(wàn)細(xì)胞中檢出 1 個(gè)分泌該蛋白的細(xì)胞。

n         捕獲抗體為高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素單抗,在研究者以刺激劑激活細(xì)胞時(shí),不會(huì)影響活化細(xì)胞分泌細(xì)胞因子。

  ELISPOT全名為Enzyme-linked Immunospot Assay,其技術(shù)原理與ELISA相似。其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是在96微孔培養(yǎng)盤(pán)底部披覆PVDF薄膜,用來(lái)吸附特殊挑選、且無(wú)毒性(不含sodium azide、內(nèi)毒素endotoxin)的單株抗體。靜脈血PBMC細(xì)胞經(jīng)適當(dāng)分離處理后,會(huì)被分配到微孔盤(pán)上,再接受適當(dāng)?shù)目乖碳?,并將微孔盤(pán)放置于溫箱中過(guò)夜培養(yǎng)一段時(shí)間。一般而言,記憶型T細(xì)胞在受抗原刺激數(shù)小時(shí)后會(huì)開(kāi)始分泌細(xì)胞激素,此時(shí)局部在緊靠分泌細(xì)胞的周?chē)?/span>分泌出的細(xì)胞激素會(huì)被PVDF薄膜上特異抗體捕獲。微孔盤(pán)中的細(xì)胞被移除并清洗后,被捕獲的細(xì)胞激素可進(jìn)一步使用生物素(Biotin)標(biāo)記的二次抗體來(lái)標(biāo)志,其后再以結(jié)合酵素的StreptAvidin與之作用,并加入酵素受質(zhì)使其呈色,有反應(yīng)作用的細(xì)胞會(huì)留下染色斑點(diǎn)。

 

ELISPOT 檢測(cè)原理 

 

  細(xì)胞受到刺激后局部產(chǎn)生細(xì)胞因子,此細(xì)胞因子被特異單克隆抗體捕獲。細(xì)胞分解后, 被捕獲的細(xì)胞因子與生物素標(biāo)記的二抗結(jié)合,其后再與堿性磷酸酶標(biāo)記的親和素結(jié)合。 BCIP/NBT 底物孵育后, PVDF 孔板出現(xiàn)“紫色”的斑點(diǎn)表明細(xì)胞產(chǎn)生了細(xì)胞因子,通過(guò) CTL 公司生產(chǎn)的 ELISPOT 酶聯(lián)斑點(diǎn)分析系統(tǒng)對(duì)斑點(diǎn)的分析后得出結(jié)果。

ELISPOT 分析儀的出現(xiàn)解決了以下問(wèn)題 

n         哪些斑點(diǎn)是抗原特異性 T 細(xì)胞產(chǎn)生的(此斑點(diǎn)具有進(jìn)一步分析價(jià)值),哪些是無(wú)關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生的(此斑點(diǎn)沒(méi)有 T 細(xì)胞研究?jī)r(jià)值)

n         斑點(diǎn)大小的意義

n         在對(duì)不同細(xì)胞因子計(jì)數(shù)和分析時(shí),如何定義斑點(diǎn)zui大和zui小尺寸

n         如何從單個(gè)細(xì)胞基礎(chǔ)上分析

n         實(shí)驗(yàn)度有多高?如果一個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生相似的細(xì)胞因子,在多大程度上會(huì)干擾分析結(jié)果?

n         幾次重復(fù)實(shí)驗(yàn)才能使結(jié)果更有意義?

 

ELISPOT 斑點(diǎn)的判讀

 

  像多數(shù)的Cell-based分析技術(shù)一樣,ELISPOT Cytokine技術(shù)也是相當(dāng)耗時(shí)、耗勞力的工作。事實(shí)上到目前為止,以目視法判讀少量細(xì)胞族群的特性如激活T細(xì)胞之激素分泌,仍被視為是免疫學(xué)技術(shù)上的一大挑戰(zhàn)。ELISPOT結(jié)果的判讀常需要專(zhuān)聘、有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)員才可以;有時(shí)就算有專(zhuān)職技師判讀,使用傳統(tǒng)的顯微鏡計(jì)算斑點(diǎn)數(shù)仍不免會(huì)偶有主觀意見(jiàn),而有所偏頗。

  科學(xué)實(shí)證的本質(zhì),在于如何使實(shí)驗(yàn)結(jié)果能盡可能客觀、、同時(shí)有高重現(xiàn)性,傳統(tǒng)的人工計(jì)算法顯然無(wú)法達(dá)到此一要求。故而有幾個(gè)科研團(tuán)隊(duì)使自行開(kāi)發(fā)Plate Scanner與自動(dòng)分析軟件,其中以Paul Lehmann教授研究開(kāi)發(fā)之ImmunoSpot? Analyzer自動(dòng)分析儀代表性。分析ELISPOT實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的過(guò)程中,儀器先以高分辨率鏡頭捕捉微小孔中膜上呈色影像,而后儲(chǔ)存成TIF檔;這些影像可以進(jìn)一步使用手動(dòng)、或是自動(dòng)方式計(jì)算斑點(diǎn)數(shù)目,如果使用ImmuneSpot分析軟件,可以先設(shè)定條件,然后同時(shí)分析斑點(diǎn)的大小,以推估激素分泌的多寡。預(yù)料像ImmunoSpot? Analyzer這一類(lèi)自動(dòng)圖像掃描分析儀器,將可克服傳統(tǒng)顯微鏡判讀方法耗費(fèi)人力、及人為客觀性等缺點(diǎn),*解除ELISPOT分析技術(shù)的瓶頸問(wèn)題,進(jìn)一步推廣該技術(shù)的新穎應(yīng)用。

  ImmunoSpot@影像掃描分析儀可以提供不同的數(shù)據(jù)格式,包括未處理與處理過(guò)的膜表面影像、每個(gè)小孔中的斑點(diǎn)數(shù)目、每個(gè)小孔中的平均斑點(diǎn)數(shù)目、每個(gè)小孔中斑點(diǎn)大小的直方統(tǒng)計(jì)圖。

 

ELISPOT技術(shù)的過(guò)去

 

  ELISPOT20多年前便己研發(fā)成功的老技術(shù)。Czerkinsky 等人在1983年,運(yùn)用該技術(shù)成功地檢測(cè)出因受激而分泌抗體的B細(xì)胞頻率。從那時(shí)起世界各國(guó)免疫學(xué)者便開(kāi)始一長(zhǎng)期的ELISPOT Cytokine技術(shù)競(jìng)賽,每個(gè)團(tuán)隊(duì)都希望能將此一技術(shù)推廣來(lái)研究T細(xì)胞免疫,其絕妙之處在提供一接近體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的環(huán)境,藉由偵測(cè)T細(xì)胞分泌的各類(lèi)細(xì)胞因子,來(lái)定量機(jī)體內(nèi)免疫反應(yīng)啟始者Precursor Tclonal size族群大小,同時(shí)預(yù)測(cè)體內(nèi)免疫系統(tǒng)即將進(jìn)行的下游免疫反應(yīng)。

  ELISPOT Cytokine技術(shù)雖說(shuō)操作簡(jiǎn)單,但該技術(shù)并沒(méi)能如預(yù)期地很快地被成功應(yīng)用在ex vivo T細(xì)胞功能研究。要讓ELISPOT技術(shù)從B細(xì)胞免疫走向T細(xì)胞免疫的產(chǎn)生的*個(gè)主要問(wèn)題,便是靈敏度的提升,因?yàn)?/span>T細(xì)胞因子較之B細(xì)胞免疫球蛋白產(chǎn)量極少。早期ELISPOT的分析條件不是非常理想,成對(duì)抗體的品質(zhì)、呈色底膜的材質(zhì)等幾個(gè)技術(shù)性的問(wèn)題,使當(dāng)時(shí)多數(shù)研究團(tuán)隊(duì)很難獲得清晰的斑點(diǎn),結(jié)果是敏感度不夠、數(shù)據(jù)分析重現(xiàn)性低。這問(wèn)題直到1996美國(guó)俄亥俄卅Case Western Reserve大學(xué)Paul Lehmann團(tuán)隊(duì)引進(jìn)PVDF薄膜的應(yīng)用(Forsthuber et al., Science, 1996),才釜底抽薪地解決了該技術(shù)因斑點(diǎn)呈色問(wèn)題造成低敏感度的缺失。與原來(lái)的標(biāo)準(zhǔn)膜面相比,PVDF薄膜提供1,000倍的較大面積來(lái)吸附單株抗體,使T細(xì)胞分泌的各類(lèi)細(xì)胞因子能在細(xì)胞周?chē)徒环?,讓呈色斑點(diǎn)集中、清晰、對(duì)比色高,大大的提高ELISPOT Cytokine分析的敏感度。圖一是使用PVDF-BASED改良薄膜(Panel A)與傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)薄膜(Panel B)并行實(shí)驗(yàn)的比較結(jié)果。同樣的人體 PBMC樣品,在通過(guò)*相同的實(shí)驗(yàn),Panel A呈現(xiàn)較清晰的小色點(diǎn)。

  第二個(gè)技術(shù)性問(wèn)題是ELISPOT Cytokine實(shí)驗(yàn)分析的幾個(gè)基本假設(shè)缺乏科學(xué)實(shí)證,也使得該技術(shù)在當(dāng)時(shí)并沒(méi)受到該有的廣泛重視。沒(méi)有科研人員嘗試去厘清一些基礎(chǔ)但很重要的問(wèn)題,諸如;   

n         實(shí)驗(yàn)所得的斑點(diǎn)是抗原特定T細(xì)胞所生產(chǎn),還是旁觀細(xì)胞受Cytokine刺激的次級(jí)效應(yīng)?

n         斑點(diǎn)的小或大有何生理意義;如何決定cutoff值?

n         能否相信斑點(diǎn)是由單一的細(xì)胞造成?

n         ELISPOT Cytokine分析技術(shù)能準(zhǔn)確測(cè)量的頻率范圍?

n         如果效應(yīng)相互拮抗的cytokine同時(shí)產(chǎn)生,它們是否會(huì)互相妨礙?及到什么程度?

 

ELISPOT 技術(shù)的現(xiàn)在

 

  1996年以來(lái)隨著抗體制備、PVDF膜材篁等技術(shù)改良,ELISPOT 分析技術(shù)已經(jīng)逐漸達(dá)到科研人員的期待,它已是當(dāng)世*zui靈敏抗原特定T細(xì)胞的體外檢測(cè)技術(shù)。藉由檢驗(yàn)新鮮分離PBMC細(xì)胞所分泌cytokine的指紋,ELISPOT 分析技術(shù)可提示T細(xì)胞免疫系統(tǒng)的兩個(gè)重要參數(shù):抗原特定T細(xì)胞的clone族群大??;和免疫效應(yīng)細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)路徑Th1/Th2。

  多年來(lái)經(jīng)過(guò)數(shù)十個(gè)研究團(tuán)隊(duì)的致力研究,對(duì)于ELISPOT分析技術(shù)本身的幾個(gè)問(wèn)題,也有了科學(xué)上的驗(yàn)證。目前一般*,ELISPOT技術(shù)允許科研人員在單細(xì)胞水平上識(shí)別抗原特定T細(xì)胞,主要針對(duì)經(jīng)由CD4或者CD8細(xì)胞的免疫反應(yīng)。在適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)下,ELISPOT Cytokine 斑點(diǎn)的數(shù)量分析顯示斑點(diǎn)是由一個(gè)單細(xì)胞所生成,同時(shí)斑點(diǎn)形態(tài)學(xué)與Time Response分析則顯示斑點(diǎn)直徑大小直接反映該細(xì)胞族群的產(chǎn)能。也因?yàn)槿绱耍?/span>ELISPOT是個(gè)免疫學(xué)上的標(biāo)竿技術(shù),它可以允許科研人員在幾乎自然生理?xiàng)l件下,觀察細(xì)胞實(shí)際分泌Cytokine的進(jìn)程,進(jìn)而可以得到藥理學(xué)信息,闡明免疫調(diào)節(jié)藥物如何影響T細(xì)胞分泌各類(lèi)cytokine的速率。藥物抑制T細(xì)胞免疫一般可通過(guò)兩程截然不同的機(jī)轉(zhuǎn);使能分泌CytokinePrecursor T細(xì)胞族群變小,或減少每Precursor T細(xì)胞的cytokine產(chǎn)能,而ELISPOT技術(shù)能提供雙份信息。

  ELISPOT分析技術(shù)的幾個(gè)特點(diǎn)已經(jīng)讓它在抗原特定T細(xì)胞免疫學(xué)上*。此技術(shù)是當(dāng)世*準(zhǔn)許百萬(wàn)分之一1:1000,000的準(zhǔn)確分析,如此強(qiáng)效的解析力使流式細(xì)胞技術(shù)也望其項(xiàng)背,以目前國(guó)內(nèi)外常規(guī)的intracellular cytokine或者Dimer/ tetramer染色,流式技術(shù)的靈敏度一般限制在1:10,000。這樣的高靈敏度對(duì)T細(xì)胞免疫學(xué)研究是必須的,因?yàn)榭乖囟?/span>T細(xì)胞一般在機(jī)體周邊循環(huán)系統(tǒng)發(fā)生的頻率通常低于萬(wàn)中取一。此外由于ELISPOT Cytokine技術(shù)被證實(shí)適用于冰凍后復(fù)蘇的人類(lèi)淋巴球,解凍后PMBC與新鮮分離樣品有相當(dāng)?shù)男r(jià),沒(méi)有喪失功能。這一點(diǎn)對(duì)臨床試驗(yàn)非常重要,它使科研人員得以并行分析免疫治療前、后的病人血樣,如果試驗(yàn)牽涉全國(guó)多個(gè)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu),病人血樣可冰存并同時(shí)集中在「*實(shí)驗(yàn)室」一齊被測(cè)試。同理,一個(gè)血樣或標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品可被分裝小份,被送到不同檢驗(yàn)中心進(jìn)行測(cè)試,以交互比對(duì),同時(shí)有利LISPOT Cytokine技術(shù)流程的規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化。

 

ELISPOT 未來(lái)展望

 

  據(jù)筆者的觀察,ELISPOT 分析技術(shù)正在歐美各國(guó)發(fā)揮它的完整潛能,它讓免疫學(xué)家可以直接洞察活體內(nèi)T細(xì)胞相關(guān)生理學(xué)或病理學(xué),就像是心臟外科醫(yī)師手上的那張心電圖,經(jīng)由這個(gè)技術(shù)科研人員可以在活體內(nèi)直接進(jìn)入一個(gè)器官系統(tǒng),在那里視察、發(fā)掘,得到全新的智識(shí)。

  從各國(guó)文獻(xiàn)可見(jiàn)ELISPOT技術(shù)已經(jīng)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的要求,并被廣泛地應(yīng)用在多項(xiàng)領(lǐng)域,包括監(jiān)視癌癥病人接受免疫療程時(shí)的反應(yīng)(Lewis, 2000 and Janetzki, 2000),以及感染性疾病(Moss, 2000, Rahman, 2000, Rowland-Jones, 1998, Herr, 1997 and Lechner, 2000)、腫瘤(Nagorsen, 2000)、或自體免疫病人體內(nèi)的一個(gè)特定的免疫反應(yīng)型式(Pelfrey, 2000)ELISPOT技術(shù)同時(shí)也在數(shù)個(gè)疫苗效價(jià)評(píng)估人體試驗(yàn)中,被當(dāng)成重要的終結(jié)指針。20031月,世界衛(wèi)生組織通過(guò)與大陸北京性艾中心合作,將應(yīng)用ELISPOT技術(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)HIV疫苗研究免疫應(yīng)答反應(yīng)技術(shù),該計(jì)劃將是利用ELISPOT技術(shù)對(duì)亞洲國(guó)家從事HIV疫苗研究和臨床試驗(yàn)的有關(guān)研究。我們期待未來(lái)此一技術(shù)能在我國(guó)免疫學(xué)界得到廣泛地應(yīng)用。

其它ELISPOT應(yīng)用范圍

 

n         移植研究 allograft rejection

n         疫苗開(kāi)發(fā) -亦可評(píng)估疫苗效力,或是疫苗注射路徑影響

n         Th0/Th1/Th2細(xì)胞轉(zhuǎn)換分析

n         自體免疫研究 免疫調(diào)節(jié)及免疫治療研究

n         癌癥研究 -腫瘤反應(yīng)T細(xì)胞作用

n         過(guò)敏機(jī)制探討 IL-4誘導(dǎo)免疫球蛋白亞型轉(zhuǎn)換,其它參與過(guò)敏機(jī)制之細(xì)胞激素研究

n         傳染疾病研究 Lyme disease, Chlamydia infections, Helicobacter pylori infections, HIV infections, multiple sclerosis, …等

n         抗原決定位定圖

n         體液免疫力研究 B細(xì)胞免疫球蛋白及特定亞型反應(yīng)的進(jìn)展研究

 

目前 CTL 公司使用 ImmunoSpot 的部分研究領(lǐng)域如下

 

n         單細(xì)胞解析度/體外抗原特異性 T 細(xì)胞頻率的準(zhǔn)確測(cè)量

n         測(cè)量 1 類(lèi)和 2 類(lèi)免疫力

n         T 細(xì)胞的同源性細(xì)胞因子產(chǎn)物與旁細(xì)胞因子產(chǎn)物

n         功能性 T 細(xì)胞親和力的測(cè)量

n         細(xì)胞因子協(xié)同表達(dá) / 雙色 ELISPOT

n         斑點(diǎn)尺寸分布

n         PBMC的體外測(cè)量的分析到分析的重可生產(chǎn)性

n         新鮮和低溫儲(chǔ)藏后的人類(lèi)PBMC的比較

n         CD 8+ T 細(xì)胞和CD8+ T 細(xì)胞和 Granzyme B ELISPOT 分析

n         除了人類(lèi) PBMC 、鼠淋巴結(jié)/脾臟細(xì)胞以外的細(xì)胞的 ELISPOT 分析

n         免疫與佐藥

n         腫瘤免疫

n         移植免疫

 

ELISPOT 技術(shù)優(yōu)勢(shì) 

 

ELISPOT 分析使單細(xì)胞分泌產(chǎn)物可視化。這些分析異常敏感,因?yàn)樗窃谥苯釉诜置诩?xì)胞的周?chē)M(jìn)行捕捉,而且是在表面被沖淡,或者被臨近的細(xì)胞上的受體捕獲,或降解之前。

zui低至1100萬(wàn)細(xì)胞精度的活體外頻率測(cè)量。這種分辨率已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)使用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的四聚物染色和 ELISA 法測(cè)量的精度。這種高敏感度是非常關(guān)鍵的,因?yàn)榭乖禺愋?/span> T 細(xì)胞在體外都是典型性的低頻率。

高產(chǎn)量 T 細(xì)胞分析成為可行。一個(gè)經(jīng)過(guò)訓(xùn)練的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室小組可以測(cè)試成百的樣本中幾十種抗原的反應(yīng)。

只需要少量細(xì)胞,就可以用于通其他細(xì)胞學(xué)分析方法進(jìn)行比較。例如,45毫升的血液就足以用于測(cè)試600種不同抗原/肽類(lèi)物質(zhì)的反應(yīng)。

可以定義CD4CD8細(xì)胞的免疫因子指標(biāo)。這是因?yàn)橹恍枰贁?shù)細(xì)胞,分析就可以在高產(chǎn)量模式下進(jìn)行。ELISPOT 分析在篩選肽庫(kù),繪制免疫因子方面是一個(gè)理想的工具。

用于確定抗原特異性 T 細(xì)胞的功能性親和力。這zui大可能受到肽類(lèi)藥物刺激至50%的影響。

可以用于研究未經(jīng)藥物處理過(guò)的細(xì)胞的分泌過(guò)程。如果觀察到凈產(chǎn)量減少,可以確定這種區(qū)別是來(lái)自于分泌細(xì)胞的減少,還是每個(gè)細(xì)胞分泌產(chǎn)量的減少。

淋巴細(xì)胞在 ELISPOT 分析后依然存活。這使得分析之后進(jìn)行增值,用于更進(jìn)一步的分析、克隆或者低溫儲(chǔ)藏成為可能。

低溫儲(chǔ)藏后的人類(lèi)淋巴細(xì)胞可以用于檢測(cè),而不會(huì)丟失其功能。治療前和治療后的樣本可以并排進(jìn)行測(cè)試,結(jié)果可以重復(fù)。

 

選擇 CTL 的原因

 

  我們是 ELISPOT 技術(shù)的世界

  我們了當(dāng)代細(xì)胞因子 ELISPOT 協(xié)議

  我們將圖像分析引入 ELISPOT

  我們制造了*臺(tái)商業(yè) ELISPOT 分析儀

  我們將細(xì)胞因子 ELISPOT 分析提升到了科學(xué)

  我們是 NIH 免疫耐受網(wǎng) ELISPOT 分析的實(shí)驗(yàn)室

  我們是 BD 公司* ELISPOT 分析儀

  我們專(zhuān)注于 ELISPOT 技術(shù)并極大拓展了其應(yīng)用領(lǐng)域

  我們是*能提供整體 ELISPOT 方案的技術(shù)提供商

      基礎(chǔ)研究

      臨床免疫監(jiān)控

      全套軟件和硬件解決方案

      全套符合 GLP 規(guī)范的 ELISPOT 實(shí)驗(yàn)室建設(shè)服務(wù)

      全面技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)

      全面的基礎(chǔ)和臨床技術(shù)合作服務(wù)

  我們是*能提供全套 ELISPOT 質(zhì)量控制的服務(wù)商

  過(guò)去 15 年中,我們專(zhuān)注于 ELISPOT 研究,取得了巨大的成功。今后我們將一如既往地與客戶一起,全力推動(dòng) ELISPOT 的技術(shù)發(fā)展和進(jìn)步。我們不僅提供 ELISPOT 全套技術(shù)解決方案,更看重并全力協(xié)助客戶掌握 ELISPOT 實(shí)驗(yàn)技術(shù)。

 

  敬請(qǐng)聯(lián)絡(luò)我們,讓我們?yōu)槟氖聵I(yè)助上一臂之力!

http://www.biohj.com

 

 

 

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言