酶標儀的選擇、自檢和校準

酶標儀的選擇、自檢和校準

    一、酶標儀的選擇

    面對類型如此眾多的酶標儀，實驗室在選擇時往往有難以適從的感覺。一般來說，用于酶免疫測定比色的酶標儀可分為普通酶標儀，多功能全自動酶標儀和全自動酶免疫分析系統(tǒng)等，普通酶標儀的功能基本上相當于一個微孑L板比色計，而多功能全自動酶標儀除了有微孔板比色功能外，還有酶標動力學，紫外乃至凝集等多種檢測功能；全自動酶免疫分析系統(tǒng)則有試劑“開放”和“限定”之分，所謂試劑“開放”是指不同品牌的ELISA試劑均可用于該儀器，而試劑“限定”則必須使用儀器的酶免測定試劑。實驗室在選擇酶標儀時，一般應(yīng)遵循這樣幾條原則：

    1．根據(jù)工作需要去選擇。切忌刻意去求功能多，因為一則如果儀器功能過多，易出故障，二則有些功能如酶標動力學或凝集等，可能根本就用不上；如果擬購置的酶標儀主要是用于定性測定，則不必要求的定量所需的軟件系統(tǒng)。至于全自動酶免疫分析系統(tǒng)則對工作量比較大的血站或大型醫(yī)院較為適用，對于日常工作量不太大的實驗室，就無必要。

    2．根據(jù)酶標儀的性能去選擇。反應(yīng)酶標儀性能的指標主要有測定波長范圍，濾光片配置，檢測速度，吸光度范圍，線性范圍，分辨率，準確度，精密度等。

    3．根據(jù)自己實驗室的財力去選擇。酶標儀品種類型多，由于性能不一，價格自然也就相差較大，實驗室可根據(jù)自己的財力去選擇性能／價格比較為合適的酶標儀。

    4．根據(jù)售后服務(wù)去選擇。實驗室儀器買了以后，就跟我們家里使用的家用電器一樣，在使用過程中及使用一段時間之后，很可能就會有保修或維修方面的問題，因此一定要選擇售后服務(wù)好的公司的酶標儀。

    5．根據(jù)實驗室人員的外語水平去選擇。進口酶標儀現(xiàn)有不少已使用中文人機對話，對于英語上有困難的實驗室，應(yīng)盡可能選用此類酶標儀。

    確定了選擇原則以后，就是怎樣去選擇了。選擇的步驟首先是要獲取有關(guān)酶標儀的信息資料，一般有這樣幾條途徑：

    ①向已購不同酶標儀的多家實驗室同行咨詢訪問，獲取zui直接的使用效果的信息；

    ②酶標儀銷售商的信息廣告及介紹；

    ③機構(gòu)的儀器評估報告。

    獲取了盡可能多的酶標儀信息資料后，就是對不同類型的酶標儀的性能指標進行比較，選擇較為適合本實驗室的一種或二，三種再向銷售商作進一步的詳細咨詢了解，以決定選擇哪一種進行自檢。

    二、酶標儀的自檢和校準從上述所獲的酶標儀性能的有關(guān)信息資料，基本上可以說是間接的，有了目標以后，如果還想獲得對某一酶標儀的感性認識，可以對其進行自檢，主要有下述幾個方面。

    （一）外觀

    酶標儀上應(yīng)有儀器名稱，型號，編號，生產(chǎn)廠家，出廠日期和電源電壓；各調(diào)節(jié)旋鈕，按鍵和開關(guān)均能正常工作，外表面無明顯機械損傷；顯示文字應(yīng)清楚完整。

    （二）酶標儀的穩(wěn)定性（漂移）

    選用492nm波長，在吸光度o．0A處，測定標稱值為1．0A的光譜中性濾光片（測定操作按儀器說明進行），記錄儀器示值或均值，10min后再次記錄儀器示值或均值，前后兩次測定值之差不應(yīng)超過±0．00。

    （三）吸光度測定的準確度

    選用405，492和620 nm波長，以空氣為參比，分別測定標稱值為0．5和1．0A的光譜中性玻璃濾光片，用測試板代替酶標板，按儀器說明連續(xù)測定3次，按下式計算準確度：AA＝1／3（A、+A。+A3）—A：（A：為標準值）。

    （四）吸光度測定的重復(fù)性

    波長選擇同（3），在酶標板*排加注空白溶液，第二排加入濃度為200rig／ml的重鉻酸鉀溶液，重復(fù)測定5次。記錄每次測定的第二排吸光度值，取第二排任一孔吸光度值與各次對應(yīng)孔吸光度值。按下式計算重復(fù)性：

    （五）酶標儀的線性

選用540nm波長，將標稱值o．5，1．0A中性濾光片分別放入測試板樣本位置中，以空氣為參比，各重復(fù)測定3次；然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測試板的同一孔位中，重復(fù)測定3次。線性誤差：

    式中A1為*片中性濾光片吸光度均值，A：為第二片中性濾光片吸光度均值，A1，2為兩片中性濾光片疊加后的吸光度均值。

    （六）測定速度的檢定  ．

    選用492nm波長，放人96孔酶標板進行測定，用秒表計測儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時間。

    酶標儀除了在選購時，應(yīng)盡可能自檢外，在使用中也應(yīng)定期檢定，以保證酶標儀測定的有效性。

    附：200ttg／ml重鉻酸鉀溶液的配制

    將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中（去蓋）置于烘箱中，在105±5℃下烘2h后，置于干燥器內(nèi)冷卻30min，在分析天平上準確稱取o．2829g，置于100ml燒杯中，用o．05mol／L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中，以少量o．05mol／L稀硫酸洗燒杯3次，洗液并入容量瓶中，用0．05mol／L稀硫酸稀釋至刻度線，搖勻。

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