免疫化學(xué)發(fā)光法（雙抗體夾心法）測定IgE

免疫化學(xué)發(fā)光法（雙抗體夾心法）測定IgE

    [檢測方法]  免疫化學(xué)發(fā)光法（雙抗體夾心法）。

    [方法學(xué)原理]  加入與磁性顆粒共價(jià)結(jié)合的鼠抗人IgE抗體、待測標(biāo)本以及吖啶酯標(biāo)記的羊抗人IgE抗體（1gElite試劑），經(jīng)過溫育形成固相包被抗體—抗原（1gE）—吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物，經(jīng)洗滌后，加人氧化劑（H₂O₂）發(fā)光，其光量子數(shù)與IgE濃度呈良好的線性相關(guān)。通過光量子數(shù)與IgE濃度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣本產(chǎn)生的光量子數(shù)可得出IgE含量。

    [標(biāo)本準(zhǔn)備]  靜脈血2ml，不抗凝。

    [試劑]

    1．免疫化學(xué)發(fā)光法配套試劑及定標(biāo)液

    2．質(zhì)控物（高、中、低）

    [儀器]  ACSl80免疫發(fā)光儀。

    [檢測步驟]

    1．將血清編號(hào)后加入反應(yīng)管內(nèi)，插入樣品盤；

    2．將試劑放入試劑盤；

    3．將編號(hào)及樣品盤號(hào)對應(yīng)輸入電腦，并選擇檢測項(xiàng)目IgE，保存；

    4．按START鍵運(yùn)行。

    5．ACSl80儀將30／Il樣本液裝入反應(yīng)杯中；將100u1 IgE lite試劑與450ul總IgE固相試劑加入，并于37℃環(huán)境中溫浴7．5min；用去離子水沖洗、分離反應(yīng)相；加入300tA試劑1與試劑2以啟動(dòng)光化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)完成后自動(dòng)報(bào)告結(jié)果（詳情見各儀器系統(tǒng)操作說明）。

  [正常參考值]  0—378U／m1

  [注意事項(xiàng)]

  1．試劑取出應(yīng)充分混勻。

  2．樣本應(yīng)充分凝固，無纖維、氣泡及其他物質(zhì)。

    3．樣本檢測應(yīng)在8h內(nèi)完成，否則應(yīng)置2～8℃保存。

    4．48h內(nèi)不檢測，應(yīng)將樣本于一20℃凍存，且只能凍融1次。

    5．若試劑室溫放置超過40h應(yīng)棄之不用，不使用任何過期試劑。

    [臨床意義]  IgE升高，主要見于過敏性疾病。在感染性疾病中，如寄生蟲感染、支氣管—肺曲霉菌病也可升高。

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