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PCR 芯片定義
實時定量 PCR 是檢測基因表達zui靈敏,zui可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監(jiān)測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數(shù)。實時定量 PCR 線性范圍廣(能達到 5 個數(shù)量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量 PCR 需要制備標準曲線和同時分析內(nèi)參基因,因此,每次實驗只能檢測少數(shù)幾個基因的表達水平,若要檢測大量基因,則工作量巨大,耗時長久。
通過簡單的,經(jīng)過優(yōu)化的實時定量 PCR 體系,如 SuperArray 的 RT 2 Profiler TM PCR 芯片,研究者可以同時研究大量基因,既可以進行某些特別感興趣的信號通路的研究,也可以作為驗證芯片結(jié)果的方法。
為了獲得理想的實驗結(jié)果, PCR 芯片面臨以下挑戰(zhàn):高特異性,高靈敏度和可重復性。高靈敏度或低檢出限,在樣品的總 RNA 量少,基因表達量低的情況下,也能檢測出目的基因。高特異性,擴增產(chǎn)物嚴格保證基因特異性,避免非特異性產(chǎn)物,如引物二聚體的產(chǎn)生??芍貜托裕ㄟ^標準化的反應(yīng)體系和實驗方法,使得多人多次重復實驗均能獲得可靠的基因定量結(jié)果。
PCR array 輔助試劑
1 RT2 First Strand Kit
Catalog Number | Product Description | |
C-08 | For 96 samples | |
C-09 | Fast Handling for First Strand cDNA Synthesis | |
C-03 | Reagents for Twelve (12) First Strand cDNA Synthesis Reactions, 20 μl each |
2 RT2 qPCR Master Mixes
根據(jù)實驗實不同的儀器類型選擇相應(yīng)的 Max mixes
RT 2 SYBR Green/ ROX: For all ABI Instrumentation | |
Cat. No. | Size |
PA-012 | For 2 RT2 Profiler? PCR Arrays OR 200 25-μl reactions (2.5 ml) |
RT 2 SYBR Green/ Fluorescein: For all BioRad Instrumentation | |
Cat. No. | Size |
PA-011 | For 2 RT2 Profiler? PCR Arrays OR 200 25-μl |
RT 2 SYBR Green: | |
Cat. No. | Size |
PA-010 | For 2 RT2 Profiler? PCR Arrays OR 200 25-μl |
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