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番茄沙司中蘇丹紅的測(cè)定 SPE-HPLC 法 解決方案

時(shí)間:2019-9-4 閱讀:2537
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蘇丹紅Ⅰ~ Ⅳ號(hào)均為人工合成的一系列偶氮類工業(yè)染料。研究表明,其原型及代謝產(chǎn)物均有一定的潛在致癌作用。近年來歐盟和我國都禁止蘇丹紅作為食品添加劑使用。但是由于蘇丹紅成本低廉,顏色鮮艷,不易褪色,一些不法商販將蘇丹紅添加到雞鴨飼料、辣椒制品、調(diào)味品等食品中,極大地危害了消費(fèi)者的健康。

目前,國內(nèi)關(guān)于蘇丹紅的檢測(cè)方法主要參考《GB/T 19681-2005 食品中蘇丹紅染料的檢測(cè)方法 液相色譜法》國家標(biāo)準(zhǔn)。迪馬科技在此標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上,將番茄沙司樣品經(jīng)正己烷提取后,使用 ProElut SDH 蘇丹紅檢測(cè)固相萃取柱進(jìn)行凈化,液相色譜法檢測(cè)。方法特點(diǎn)如下:

1. 凈化過程使用商品化的蘇丹紅檢測(cè)固相萃取柱,無需按照國標(biāo)方法進(jìn)行層析柱的填裝和中性氧化鋁的活度調(diào)整,避免了中性氧化鋁活度容易受環(huán)境影響而引起蘇丹紅回收率不穩(wěn)定的弊端;

2. 使用 ProElut SDH 蘇丹紅檢測(cè)固相萃取柱重現(xiàn)性和回收率結(jié)果更加穩(wěn)定可靠;

3. 方法檢出限 10 μg/kg,與國標(biāo) GB/T 19681-2005 要求低檢出限要求相同。以下為詳細(xì)解決方案,敬請(qǐng)參考!

番茄沙司中蘇丹紅的測(cè)定 SPE-HPLC 法

1、適用范圍

本方法適用于番茄沙司中蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ和蘇丹紅Ⅳ的檢測(cè),定量限 10 μg/kg。


2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:各準(zhǔn)確稱取 10 mg 標(biāo)準(zhǔn)品,用乙醚溶解后,用正己烷定容至 100 mL,配制成 100 μg/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

混合標(biāo)準(zhǔn)中間液:準(zhǔn)確吸取 10 μL 和 100 μL 的 100 μg/mL 混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,揮干,用乙腈分別稀釋成 1.0 μg/mL 和 10 μg/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。


3、提取

(1) 取 5.0 g 樣品,加入 20 mL 正己烷混合,振蕩 5 min,超聲提取 5 min,8000 rpm 下離心2 min,收集上清液

(2) 將下層殘留物用 20 mL 正己烷按照步驟(1)重復(fù)提取一次,合并兩次上清液;

(3) 將上清液在 40 ℃水浴條件下,減壓蒸至近干,再加入 5 mL 正己烷混勻,待凈化。


4、凈化—— ProElut SDH 6 mL(Cat.# 65909)

a活化: 5 mL正己烷活化;
b上樣: 加入待凈化液,控制流速1滴/秒,棄去流出液;
c淋洗: 依次加入5 mL正己烷,5 mL 1%乙酸乙酯正己烷,控制流速1滴/秒,棄去流出液;
d洗脫: 加入10 mL 30%乙酸乙酯正己烷,控制流速1滴/秒,收集流出液;
e重新溶解: 將洗脫液在40 ℃下減壓蒸干,用乙腈定容至1 mL,供HPLC分析。


5
、分析條件

色譜柱:Diamonsil C18(2), 250 × 4.6 mm, 5 μm(Cat# 99603) 流速:1.0 mL/min

進(jìn)樣量:20 μL

柱溫:40 ℃

檢測(cè)器:PDA 518 nm

流動(dòng)相:A:0.2% 磷酸水溶液B:乙腈梯度設(shè)置

 

6、添加回收結(jié)果

番茄沙司中蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ和蘇丹紅Ⅳ的 HPLC 檢測(cè)添加回收結(jié)果

化合物名稱 回收率(%)
添加水平:10 μg/kg 添加水平:100 μg/kg
加標(biāo)量:1.0 μg/mL,加 50 μL 加標(biāo)量:10 μg/mL,加 50 μL
蘇丹紅Ⅰ 97.41 98.98
蘇丹紅Ⅱ 98.7 100.84
蘇丹紅Ⅲ 110.48 89.97
蘇丹紅Ⅳ 102.21 93.64

 

Time (min)

蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ(0.05 μg/mL)標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖

 

Time (min)

蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ(0.5 μg/mL)標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖

 

Time (min)

添加水平為 10 ug/kg 的番茄沙司中蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ檢測(cè)液相色譜圖

Time (min)

添加水平為 100 μg/kg 的番茄沙司中蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ檢測(cè)液相色譜圖

 

Time (min)

番茄沙司中蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ檢測(cè)(空白)液相色譜圖

 

番茄沙司中蘇丹紅的測(cè)定 SPE-HPLC 法相關(guān)產(chǎn)品信息:

貨號(hào) 名稱 規(guī)格
樣品前處理
65909 蘇丹紅檢測(cè)固相萃取柱 ProElut SDH 6 mL, 30/pk
244358 12 管防交叉污染真空 SPE 萃取裝置 12 位
4803 1,3,6mL 柱管通用連接器 15/pk
4806 考克(控制流量) 15/pk
99011 真空/正壓兩用泵,無油 1/pk
99013 抽濾瓶套裝 1/pk
 
(包括硅橡膠管 2 米,2L 抽濾瓶及橡膠塞)
30039 FitMax 針頭式過濾器 Nylon 13 mm, 0.22 μm 100/pk
30040 FitMax 針頭式過濾器 Nylon 13 mm, 0.45 μm 100/pk

 

色譜柱及保護(hù)柱
99603 反相液相色譜柱 Diamonsil C18(2) 250 × 4.6 mm, 5 μm
6201 EasyGuard C18 保護(hù)柱套裝 10 × 4.0
 
1個(gè)柱套 + 2個(gè)柱芯
標(biāo)準(zhǔn)品
50P-C16986101 蘇丹紅Ⅰ[842-07-9] 250 mg
50P-C16986102 蘇丹紅Ⅱ[3118-97-6] 250 mg
50P-C16986103 蘇丹紅Ⅲ[85-86-9] 250 mg
50P-C16986104 蘇丹紅Ⅳ[85-83-6] 250 mg
HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對(duì)試劑
50101 乙腈 HPLC 級(jí) 4 L
50115 正己烷 HPLC 級(jí) 4 L
50104 乙酸乙酯 HPLC 級(jí) 4 L
50133 磷酸 HPLC 級(jí) 50 mL
通用色譜產(chǎn)品
52401B 瓶架/藍(lán)色 50 孔
52401A 瓶架/白色 50 孔
1034 樣品瓶(棕色/螺紋) 2 mL, 100/pk
1035 樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝) 100/pk
H80465 HPLC 進(jìn)樣針 25 μL

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