產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：甲苯50mL×1 瓶，4℃保存。自備。
試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：粉劑×2 瓶，4℃避光保存，臨用前每瓶加15mL 試劑一溶解。
測(cè)定意義：漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。
測(cè)定原理：漆酶分解底物ABTS 產(chǎn)生ABTS 自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測(cè)定ABTS自由基的增加速率，可計(jì)算得漆酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、震蕩儀，甲苯。
測(cè)定操作：
一、樣本處理
將新鮮土樣過40 目篩，按照土樣質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為1：5~10 的比例（建議稱取
0.1g 土樣，加入1mL 提取液）加入提取液，30℃震蕩提取30min，于4℃，10000g，離心10min，取
上清置于冰上待測(cè)。
二、測(cè)定操作
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到420nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 取1mL 玻璃比色皿，加入100μ L 上清液，再加入600μ L 工作液，立即于420nm 處測(cè)定吸光值，
記為A1。
3. 記錄完數(shù)據(jù)立即將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至1.5mL 棕色Ep 管，置于震蕩儀上，30℃震蕩反應(yīng)5min， 取出
反應(yīng)液立即于420nm 處測(cè)定吸光值，記為A2?！?A=A2-A1
三、酶活性計(jì)算公式
酶活性定義：每克土壤每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
SL 活性（nmol/min/g）= △ A/(ε×d)×V 反總÷（V 樣×W÷V 樣總）÷T= 38.9×△ A÷W ? ? ?
ε：ABTS 毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應(yīng)總體積， 0.7mL；
V 樣：反應(yīng)中樣本體積，0.1mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL； W，樣本質(zhì)量， g；T：反應(yīng)時(shí)間，5min。