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島津LC-10AT液相色譜儀使用流程與規(guī)范

閱讀:4710      發(fā)布時(shí)間:2012-9-1
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  島津LC-10AT液相色譜儀,是一款高性?xún)r(jià)比高*的HPLC,下文為該款機(jī)型的使用流程的規(guī)范:1.目的
  
  規(guī)范島津LC-10AT型液相色譜儀的使用。
  
  2.范圍
  
  適用于島津LC-10AT型液相色譜儀的使用。
  
  3.職責(zé)
  
  質(zhì)檢員對(duì)本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。
  
  4.規(guī)程
  
  4.1系統(tǒng)組成:本系統(tǒng)由2個(gè)LC-10ATvp溶劑輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、Rheodyne7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥、SPD-10Avp紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器、N2000色譜數(shù)據(jù)工作站和電腦等組成,另外還包括打印機(jī)、不間斷電源等輔助設(shè)備。
  
  4.2準(zhǔn)備
  
  4.2.1準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相,用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾,超聲脫氣20min。
  
  4.2.2根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱(注意方向)和定量環(huán)。
  
  4.2.3配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液(也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制),用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾。
  
  4.2.4檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。
  
  4.3開(kāi)機(jī):接通電源,依次開(kāi)啟不間斷電源、B泵、A泵、檢測(cè)器,待泵和檢測(cè)器自檢結(jié)束后,打開(kāi)打印機(jī)、電腦顯示器、主機(jī),zui后打開(kāi)色譜工作站。
  
  4.4參數(shù)設(shè)定
  
  4.4.1波長(zhǎng)設(shè)定:在檢測(cè)器顯示初始屏幕時(shí),按[func]鍵,用數(shù)字鍵輸入所需波長(zhǎng)值,按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出到初始屏幕。
  
  4.4.2流速設(shè)定:在A泵顯示初始屏幕時(shí),按[func]鍵,用數(shù)字鍵輸入所需的流速(柱在線時(shí)流速一般不超過(guò)1ml/min),按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
  
  4.4.3流動(dòng)相比例設(shè)定:在A泵顯示初始屏幕時(shí),按[conc]鍵,用數(shù)字鍵輸入流動(dòng)相B的濃度百分?jǐn)?shù),按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
  
  4.4.4梯度設(shè)定
  
  4.4.4.1在A泵顯示初始屏幕時(shí),按[edit]鍵,[Enter]鍵;
  
  4.4.4.2用數(shù)字鍵輸入時(shí)間,按[Enter]鍵,重復(fù)按[func]鍵選擇所需功能(FLOW設(shè)定流速,BCNC設(shè)定流動(dòng)相B的濃度),按[Enter]鍵,用數(shù)字鍵輸入設(shè)定值,按[Enter]鍵;
  
  4.4.4.3重復(fù)上一步設(shè)定其它時(shí)間步驟;
  
  4.4.4.4用數(shù)字鍵輸入停止時(shí)間,重復(fù)按[func]鍵直至屏幕顯示STOP,按[Enter]鍵。按[CE]鍵退出。
  
  4.5更換流動(dòng)相并排氣泡
  
  4.5.1將A/B管路的吸濾器放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相的儲(chǔ)液瓶中;
  
  4.5.2逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)A/B泵的排液閥180°,打開(kāi)排液閥;
  
  4.5.3按A/B泵的[purge]鍵,pump指示燈亮,泵大約以9.9ml/min的流速?zèng)_洗,3min(可設(shè)定)后自動(dòng)停止;
  
  4.5.4將排液閥順時(shí)針旋轉(zhuǎn)到底,關(guān)閉排液閥。
  
  4.5.5如管路中仍有氣泡,則重復(fù)以上操作直至氣泡排盡。
  
  4.5.6如按以上方法不能排盡氣泡,從柱入口處拆下連接管,放入廢液瓶中,設(shè)流速為5ml/min,按[pump]鍵,沖洗3min后再按[pump]鍵停泵,重新接上柱并將流速重設(shè)為規(guī)定值。
  
  4.6平衡系統(tǒng)
  
  4.6.1按《N2000色譜數(shù)據(jù)工作站操作規(guī)程》打開(kāi)“在線色譜工作站”軟件,輸入實(shí)驗(yàn)信息并設(shè)定各項(xiàng)方法參數(shù)后,按下“數(shù)據(jù)收集”頁(yè)的[查看基線]按鈕。
  
  4.6.2等度洗脫方式
  
  4.6.2.1按A泵的[pump]鍵,A、B泵將同時(shí)啟動(dòng),pump指示燈亮。用檢驗(yàn)方法規(guī)定的流動(dòng)相沖洗系統(tǒng),一般zui少需6倍柱體積的流動(dòng)相。
  
  4.6.2.2檢查各管路連接處是否漏液,如漏液應(yīng)予以排除。
  
  4.6.2.3觀察泵控制屏幕上的壓力值,壓力波動(dòng)應(yīng)不超過(guò)1MPa。如超過(guò)則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡,按4.5.6操作。
  
  4.6.2.4觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min,噪聲為<0.001mV時(shí),可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài),可以進(jìn)樣。
  
  4.6.3梯度洗脫方式
  
  4.6.3.1以檢驗(yàn)方法規(guī)定的梯度初始條件,按4.6.2項(xiàng)下方法平衡系統(tǒng)。
  
  4.6.3.2在進(jìn)樣前運(yùn)行1~2次空白梯度。方法:按A泵的[run]鍵,prog.run指示燈亮,梯度程序運(yùn)行;程序停止時(shí),prog.run指示燈滅。
  
  4.7進(jìn)樣
  
  4.7.1進(jìn)樣前按檢測(cè)器[zero]鍵調(diào)零,按軟件中[零點(diǎn)校正]按鈕校正基線零點(diǎn),再按一下[查看基線]按鈕使其彈起。
  
  4.7.2用試樣溶液清洗注射器,并排除氣泡后抽取適量。

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