副溶血性弧茵分子生物學(xué)研究進(jìn)展

1．基因組DNA
基因組DNA所包含的遺傳信息決定了不同生物之間以及同種生物的不同亞種／株系之間的差異，對于副溶血弧菌基因組DNA的研究將有助于對該菌更深層次的了解。關(guān)于弧菌的基因組，國外有很多報道，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為弧菌具有兩條環(huán)狀的染色體，Heidelberg等公布了霍亂弧菌的基因組全序列。

Yamaichi等和Togomori等分別對副溶血弧菌KP+株和KP-株的基因組進(jìn)行了研究，結(jié)果表明兩者都具有兩條呈環(huán)狀的大染色體和小染色體，且相應(yīng)的基因位點在基因組中高度保守，但大染色體中的基因排列順序則有明顯差異，tdh基因位于小染色體上一個單個Not I限制性內(nèi)切酶消化片段。與霍亂弧菌的染色體比較發(fā)現(xiàn)，兩者的大染色體大小基本相同，但小染色體則相差很大（分別為1. 9Mb和1．1Mb）。作者認(rèn)為，位于小染色體上的tdh基因編碼區(qū)形成一個致病區(qū)是導(dǎo)致這種差異的主要原因。Togomori等通過比較KP+株和KP-株的基因圖譜還發(fā)現(xiàn)，利用限制性內(nèi)切酶I--CeuI消化染色體DNA后兩者分別攜帶10個和9個rrn操縱子，有研究報道rrn操縱子數(shù)目增加有利于菌體在持續(xù)流動的環(huán)境中存活。

2．質(zhì)粒
細(xì)菌質(zhì)粒的研究，特別是質(zhì)粒圖譜分析，既可應(yīng)用于細(xì)菌毒力、耐藥性和致病性等方面研究，還可應(yīng)用于傳染性疾病、食物中毒流行病學(xué)調(diào)查，其簡便、快速、準(zhǔn)確性高的優(yōu)點，日益受到重視。關(guān)于副溶血弧菌質(zhì)粒的研究，國內(nèi)外均有報道，一般認(rèn)為V．p中有兩種柿?，一种为脫]忻饗隕锘钚緣鬧柿＃匆沃柿＃硪恢治猂質(zhì)粒，其可介導(dǎo)對多種抗生素的耐藥性。Arai在ST550Vp質(zhì)粒研究中也證實存在兩種質(zhì)粒，一種類型質(zhì)粒的分子質(zhì)量為55Mu，另一種類型的質(zhì)粒（pSA55）的分子質(zhì)量為112Mu，轉(zhuǎn)移結(jié)合試驗證實，攜帶pSA55質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移結(jié)合子有較高的抗藥活性，可介導(dǎo)V．p對氯霉素、四環(huán)素、鏈霉素、卡那霉素、青霉素和*氧氨嘧啶的抗藥性，只攜帶55Mu質(zhì)粒的V．p則喪失抗藥性。

3．鞭毛基因系統(tǒng)
國內(nèi)外試驗證明，副溶血弧菌具有兩種鞭毛形式，即周身鞭毛和極性鞭毛。當(dāng)生活在底物表面或黏性環(huán)境中，細(xì)菌表達(dá)周生鞭毛系統(tǒng)；當(dāng)生活在非黏性的液體中，細(xì)菌表達(dá)極鞭毛系統(tǒng)。遺傳分析指出兩者的基因系統(tǒng)不同，其結(jié)構(gòu)和裝配成分并不分享。副溶血弧菌極鞭毛約有57個基因和3個開放讀碼框編碼，其lla1基因開放讀碼框為306bp，編碼蛋白大小類似于大腸桿菌fliT基因產(chǎn)物，與其他種細(xì)菌鞭毛相比無類似物。可見溶血弧菌鞭毛基因系統(tǒng)復(fù)雜，可能要幾個基因表達(dá)產(chǎn)物才能起到免疫保護(hù)作用