目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>糖代謝系列>> BC4390-50T/48SD-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝
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更新時(shí)間:2024-04-16 15:20:04瀏覽次數(shù):587評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號(hào) | BC4380 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 血氨含量檢測(cè) |
D-木糖含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):BC4390
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一A | 粉劑×4瓶 | 常溫保存 |
試劑一B | 液體80 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 試劑一的配制:臨用前取一瓶試劑一A加入20mL試劑一B,溶解后備用,2-8℃保存1周,若試劑變黃色則已經(jīng)變質(zhì),不能繼續(xù)使用。
2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg木糖。臨用前加入1 mL蒸餾水配制成10mg/mL木糖標(biāo)準(zhǔn)溶液備用,2-8℃保存4周。
產(chǎn)品說(shuō)明:
木糖是一種戊糖。天然D-木糖是以多糖的形態(tài)存在于植物中。木糖可以活化人體腸道內(nèi)的雙岐桿菌并促其生長(zhǎng),雙歧桿菌是益菌,該菌越多越有益人體健康,食用木糖能改善人體的微生物環(huán)境,提高機(jī)體的免疫能力;同時(shí)木糖在小腸上段吸收后不參與體內(nèi)的代謝,經(jīng)腎臟排出。因此,D-木糖的吸收一直作為小腸吸收不良的重要功能指標(biāo)。
D-木糖在強(qiáng)酸條件下水解產(chǎn)生糠醛,糠醛可與間 苯*反應(yīng)生成粉紅色化合物,在554 nm處有特殊吸收峰,據(jù)此可由吸光值計(jì)算出樣本中木糖的含量。
低檢出限:0.0007 mg/mL
線性范圍:0.0039-0.4 mg/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、鼓風(fēng)烘箱、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、30-50目篩、EP管、冰和蒸餾水。
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
1、植物樣本:將供試的植物樣本在65℃的鼓風(fēng)烘箱中烘干,研磨成粉狀,過(guò)30-50目篩。按質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1 : 50~100比例(建議稱取20mg烘干樣本,加入1.0 mL提取液),渦旋混勻,在100℃水浴鍋中準(zhǔn)確水解2 h。然后10000 rpm,室溫離心15 min,棄沉淀,取上清液待測(cè)。
2、組織樣本:按質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1 : 5~10比例(建議稱取0.1g樣本,加入1.0 mL提取液),研磨勻漿后,在100℃水浴鍋中準(zhǔn)確水解2 h,然后于10000 rpm,室溫離心15 min,棄沉淀,取上清液待測(cè)。
3、血清(漿)等液體樣本:直接測(cè)定。
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至554 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至0.4、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
3、 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:
序號(hào) | 稀釋前濃度(mg/mL) | 標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL) | 蒸餾水體積(µL) | 稀釋后濃度(mg/mL) |
1 | 10 | 100 | 900 | 1 |
2 | 1 | 200 | 300 | 0.4 |
3 | 1 | 250 | 750 | 0.25 |
4 | 0.25 | 500 | 500 | 0.125 |
5 | 0.125 | 500 | 500 | 0.0625 |
6 | 0.0625 | 500 | 500 | 0.03125 |
7 | 0.03125 | 500 | 500 | 0.015625 |
8 | 0.015625 | 500 | 500 | 0.0078 |
備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需200µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4、 操作表(在1.5mL EP管中操作):
試劑名稱(μL) | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本 | 200 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)品溶液 | - | 200 | - |
蒸餾水 | - | - | 200 |
試劑一 | 1000 | 1000 | 1000 |
渦旋混勻,準(zhǔn)確沸水浴8min(EP管蓋緊并用封口膜密封,避免水分散失影響體系),冰浴冷卻至常溫,測(cè)定554nm下的吸光度A,分別記為A測(cè)定管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管,計(jì)算ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A空白管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)1-2次。 |
三、D-木糖含量的計(jì)算
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(x,mg/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(y,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測(cè)定(y,ΔA測(cè)定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(x,mg/mL)。
2、D-木糖含量的計(jì)算:
(1)植物中木糖含量(mg/g)=x×V提取÷W1=x÷W1
(2)組織中木糖含量(mg/g)=x×V提取÷W2= x÷W2
(3)血清(漿)木糖含量(mg/mL)= x×V樣÷V樣=x
V樣:加入樣本體積,0.2 mL;V提取:加入提取液的體積,1 mL;W1:植物樣本的質(zhì)量,g;W2:組織樣本的質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
1、如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
2、試劑一B因有強(qiáng)烈刺激性氣味,過(guò)多吸入對(duì)人體有害,故建議在通風(fēng)櫥中進(jìn)行操作。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
1、 稱取0.05g衛(wèi)矛莖加入0.5mL提取液進(jìn)行樣本處理,取上清后稀釋2倍按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得并計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A空白管=0.639-0.002=0.637,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=2.3529x+0.0015,計(jì)算x=0.27,按照公式計(jì)算得:
植物中木糖含量(mg/g)=x×V提取÷W1×2(稀釋倍數(shù))=0.27×0.5÷0.05×2=5.4 mg/g。
BC2620/BC2625 β-木糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒
BC2690/BC2695 葡萄糖脫氫酶(GCDH)活性檢測(cè)試劑盒
BC4290/BC4295 N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性檢測(cè)試劑盒
D-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝 D-木糖含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝
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