超液相色譜是分離科學(xué)中的一個(gè)全新類(lèi)別
超液相色譜是分離科學(xué)中的一個(gè)全新類(lèi)別，UPLC借助于HPLC(液相色法)的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測(cè)手段等全新技術(shù)，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。目前，超液相色譜儀已經(jīng)開(kāi)始逐漸地投入液相實(shí)驗(yàn)中。
超液相色譜法的原理與液相色譜法基本相同，所改變的地方有以下幾點(diǎn):
(1)小顆粒、高性能微粒固定相的出現(xiàn)。 液相色譜的色譜柱，例如常見(jiàn)的十八烷基硅膠鍵合柱，它的粒徑是5um，而超液相色譜的色譜柱，會(huì)達(dá)到3.5um，甚至1.7um。這樣的孔徑更加利于物質(zhì)分離
(2)超高壓輸液泵的使用。
由于使用的色譜柱粒徑減小，使用時(shí)所產(chǎn)生的壓力也自然成倍增大。故液相色譜的輸液泵也相應(yīng)改變成超高壓的輸液泵。
(3)高速采樣速度的靈敏檢測(cè)器。
(4)使用低擴(kuò)散、低交叉污染自動(dòng)進(jìn)樣器。配備了針內(nèi)進(jìn)樣探頭和壓力輔助進(jìn)樣技術(shù);
(5)儀器整體系統(tǒng)優(yōu)化設(shè)計(jì)。色譜工作站配備了多種軟件平臺(tái)，實(shí)現(xiàn)超液相分析方法與液相分析方法的自動(dòng)轉(zhuǎn)換。
與傳統(tǒng)的HPLC相比，UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍，它縮短了分析時(shí)間，同時(shí)減少了溶劑用量降低了分析成本。
不過(guò)由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中儀器內(nèi)部壓力過(guò)大，超液相色譜也會(huì)產(chǎn)生相對(duì)應(yīng)的問(wèn)題。例如泵的使用壽命會(huì)相對(duì)降低，儀器的連接部位老化速度加快，包括單向閥等部位零件容易出現(xiàn)問(wèn)題等。
如今，超液相色譜儀主要應(yīng)用于
(1)藥物分析 如天然產(chǎn)物中復(fù)雜組分的分析
(2)生化分析 如蛋白質(zhì)、多肽、代謝組學(xué)等生化樣品
(3)食品分析 如食品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)
(4)環(huán)境分析 如水中微囊藻毒素的檢測(cè)
(5)其他 如化妝品中違禁品的檢測(cè)
超液相色譜儀尤其對(duì)中藥研究領(lǐng)域的發(fā)展是一個(gè)極大的促進(jìn)。中藥的組分復(fù)雜，分離困難等問(wèn)題都可以通過(guò)超液相色譜法逐漸解決。在同樣條件下，UPLC能分離的色譜峰比HPLC多出一倍還多。在同樣條件下，UPLC的分辨率能夠認(rèn)出更多的色譜峰。
相信在分析實(shí)驗(yàn)室中超液相色譜會(huì)越來(lái)越普及，讓液相色譜法得到飛躍和進(jìn)步。
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