細胞會在細胞外環(huán)境中釋放不同類型的膜源性囊泡。這些膜源性囊泡被稱為胞外囊泡（EV），包括外泌體和微泡體。外泌體是相對較小的胞外囊泡（30-150nm），可在細胞之間轉移核酸、蛋白質、酶和脂質等生物大分子，是細胞間通訊的重要模式。此外，它們可以用作各種疾病的生物標志物，也可以作為下一代治療劑的天然藥物遞送載體系統(tǒng)。

在本文中，我們描述了一種通過結合高速和超速離心機從脂肪源性干細胞中快速、簡單地分離外泌體的方法。細胞在BioBLU® 0.3c 一次性生物反應罐中培養(yǎng)，并由 DASbox®迷你生物反應器系統(tǒng)控制。DASbox 迷你生物反應器系統(tǒng)可以培養(yǎng)大量干細胞，從而獲得高產(chǎn)量的外泌體。隨后，我們使用 CR22N 離心機對條件培養(yǎng)基進行了清除。這是一臺高速離心機，RCF 高達 32,300 x g。在本文，我們使用了可同時容納 10 x 50 mL 和 10 x 15 mL 錐底管的 R15A 固定角轉。為了進一步濃縮外泌體，我們使用了最大 RCF 為803,000 x g 的 CP100NX 超速離心機以及能夠容納6 x 40 mL 離心管的 P32ST 水平轉子。此外，相比于不使用蔗糖墊液的對照組，通過在超速離心步驟中使用蔗糖墊液，可以快速分離出純凈均一的外泌體。在整個離心過程中，我們都使用了大容量轉子，從而減少了重復的離心步驟，并將外泌體分離時間縮短到 4 小時以內，快于沉淀或過濾等其他分離方法。

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