紫外分光光度計的吸光度、波長或波數(shù)和雜散光校正方法

      吸光度的校正方法

      校正吸光度經(jīng)常用到一很純物質(zhì)一定濃度的溶液為標(biāo)準(zhǔn)，且此溶液的吸光度系數(shù)經(jīng)不同實驗室核對，為了使標(biāo)準(zhǔn)液吸光度不受測定波長的微移動而有改變，常選擇具有較平滑吸取高峰的物質(zhì)，同時要求溶液穩(wěn)定，且在相當(dāng)?shù)牟ㄩL范疇內(nèi)吸取度的改變符合Beer-Lambert定律，經(jīng)常用到硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是較為經(jīng)常用到的標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液在紫外區(qū)和可見區(qū)均適用。
 

      波長或波數(shù)的校正方法

      紫外分光光度計可用具有窄吸取帶的溶液，濾光片或蒸氣來校正所需要的光波范疇。如果要求很高的精密度時，可用放電燈泡發(fā)射的射線來校正。有的光譜儀其上已裝有一個為校正用的燈。 

      蒸氣對校正一定范疇的波長亦很有用，可用一小滴苯放于一厘米厚的吸取杯中，測其吸取波長，在遠(yuǎn)紫外區(qū)可用氧氣的吸取帶進行校正。 

      用各種稀土金屬的濾光片，可以很快地校正波長，但準(zhǔn)確度不如上述方法高。經(jīng)常用到含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。

      
      雜散光的校正方法

      紫外分光光度計小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差，它的校正可用一個能*吸取某一波長單色光，且在其他波長吸取很弱的溶液。從這個溶液所表現(xiàn)的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸取帶，亦可用Beer-Lambert定律來檢查，但用此定律檢查偽吸取帶誤差較大。由切斷范疇之外所表現(xiàn)的透射比可得出近似的雜散光百分?jǐn)?shù)。若所含雜散光大于0.1%，應(yīng)設(shè)法減低，或?qū)y得的吸取光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比，因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計算而得。此外，還可用一個適當(dāng)?shù)臑V光片，該濾光片在測定波長范疇內(nèi)*透光，但吸取此范疇外的光波，由此來消除雜散光。

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