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巨噬細胞去除實驗
點擊次數(shù)：9917 發(fā)布時間：2013-7-9
去除巨噬細胞是研究巨噬細胞功能的重要方法。巨噬細胞可吞噬clodronate Liposome，在溶酶體的作用下，clodronate可釋放出來，當其達到一定濃度時，可引起巨噬細胞的凋亡，從而去除巨噬細胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位臨近的巨噬細胞，如肺、膝關(guān)節(jié)、腫瘤局部和腦等；也可尾靜脈或腹腔注射去除循環(huán)途徑中的單核巨噬細胞，如肝臟和脾臟中的巨噬細胞。
1. 脂質(zhì)體的準備
美國的FormuMax Scientific可以提供多種clodronate Liposome 具體產(chǎn)品可以上http://www.liposomeexpert.com查詢，他們中國代理商是上海起福生物科技有限公司
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2. 脂質(zhì)體的體內(nèi)注射
隔日尾靜脈注射200ul clodronate liposome，根據(jù)實驗要求制定注射日程。通過免疫組化或流式檢測巨噬細胞的去除效率。
尾靜脈注射方法：
1. 將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi)，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈，2條動脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面，3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈；
2. 將紗布浸泡于約70度的溫水中，拿出后包裹尾巴，以達到使尾部血管擴張及軟化表皮角質(zhì)的目的；
3. 行尾部靜脈注射時，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出約
有的實驗需連日反復尾靜脈注射給藥，注射部位應盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動，更換血管位置注射給藥。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓1-2min，止血。