氨基酸的測(cè)定

 價(jià)谷物和其它作物產(chǎn)品以及飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值時(shí)，需要 測(cè)定氨基酸的總量及全氨基酸中各個(gè)氨基酸的含量。 測(cè)定氨基酸總量的方法與蛋白質(zhì)測(cè)定有密切關(guān) 系，許多測(cè)定蛋白質(zhì)全氮含量的方法如凱氏法及各種 比色法均可用于測(cè)定氨基酸的總量.比較常用的方法 為布三酮比色法及各種色譜法。應(yīng)用zui早的紙層析法， 設(shè)備操作簡(jiǎn)單，但分離效果差，難于定量;薄層層析，層 析速度快，靈敏度比紙層析高。氣相色譜法，分析速度 快、靈敏度高，唯分析前必須將氛基酸轉(zhuǎn)化為易揮發(fā)的 衍生物，才能測(cè)定。有一些氨基酸容易熱分解，影響定 量結(jié)果。液相色譜（HPLC）法對(duì)氨基酸分析是一 種快速而可靠的方法。 帶三明比色法在一定pH值下，游離氨基酸與 水合布三酮反應(yīng)，生成藍(lán)紫色的茍二酮炔一茹二酮胺 （diketohydrindy lidene diketohydrindamine，簡(jiǎn)稱DY- DA）。其顏色的深淺與氨基酸含量成正比。據(jù)此，可用 分光光度計(jì)，在波長(zhǎng)570納米下，測(cè)定DYDA的吸收 值。用以計(jì)算試樣中氨基酸的含量。 氛基酸自動(dòng)分析儀法見氮基酸分析儀。 液相色譜法通常將氨基酸轉(zhuǎn)化為具有熒光 的DNS一氨基酸（是熒光試劑DNS一CI二甲基氨基蔡 磺酞氛與氨基酸結(jié)合成的衍生物），以熒光檢測(cè)器測(cè)定 氨基酸。下圖是DNS一氨基酸液相色譜圖，是用 熒光檢測(cè)器鑒定的。從圖中可以看出，使用液相色 側(cè)眼識(shí)似貧斗 氮驀酸的測(cè)定（determination。f。mino- acid）對(duì)植物樣品中一類含氨基的有機(jī)化合物進(jìn) 行定量分析的過程。測(cè)定植物生育期中體內(nèi)氨基酸的 含量，對(duì)于研究根系生理、氮素代謝有重要作用。在評(píng) DNS一氮墓酸液相色譜圖 1.DNS一Cl;2.DNS一酞胺;3.異亮氮酸;4.亮氮酸 5.順氮酸;6，脯氛酸;7.苯丙氛酸，8.蛋氨酸;9.丙氛酸; 10.賴氮酸.11.酪氮酸;12.甘氮酸;13.色氮酸14.谷氮 酸;15.蘇氮酸;16.絲氮酸;17.門冬教酸;18.為l~17 的化合物;19.脫氛酸，20.組氛酸;21.精氮酸 譜法，結(jié)合熒光檢測(cè)技術(shù)可以有效的分離及測(cè)定氨基 酸。選擇激發(fā)波長(zhǎng)為 340納米，發(fā)射波長(zhǎng)為51。納米。 也有將氨基酸生成有紫外吸收的衍生物，用紫外檢測(cè) 器檢測(cè);用得zui普遍的是制成苯基海硫因氨基酸 、r:”氨基酸》。不但便于紫外檢測(cè)，而且也是測(cè)定多 膚和蛋白質(zhì)中氮基酸順序的重要技術(shù)。