酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳技術(shù)

酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳技術(shù)

一，抗原對流免疫電泳電泳的原理

酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳時(shí)，將酶標(biāo)記抗原代替未標(biāo)記抗原，在堿性條件下，凝膠內(nèi)酶標(biāo)記抗原向正極移動，抗體在內(nèi)滲液流作用下慢慢向負(fù)極移動，然后形成酶標(biāo)記抗原－抗體免疫復(fù)合物，zui后用底物顯色。

酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳程序（檢測血吸蟲病）

1，  抗原血吸蟲卵蛋白質(zhì)純化

2，  酶標(biāo)記抗原（血吸蟲卵蛋白質(zhì)）

3，  酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳

（1）器材與設(shè)備

（2）器材與試劑：酶標(biāo)蟲卵抗原溶液；健，病兔血清或健，病人血清;底物溶液：先配成飽和聯(lián)苯胺溶液，然后用等量0.01mol/L pH 7.6硼酸緩沖液稀釋，在臨用前加入H2O2，使H2O2終濃度為0.01%。

（3）實(shí)驗(yàn)程序：

按常規(guī)方法進(jìn)行對流免疫電泳與漂洗。

在底物與供氫體溶液中，室溫（20－25℃）反應(yīng)3h。

觀察和記錄。

4，  討論

（1）       酶標(biāo)記蟲卵抗原保存時(shí)間以1個(gè)月內(nèi)為宜。

（2）       制備了酶標(biāo)抗體，也可以用該法檢測相應(yīng)的抗原。