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上海恒遠(yuǎn)為您分享:如何確定抗體的Z佳稀釋度比例

閱讀:3035          發(fā)布時(shí)間:2017-8-10

    大家在稀釋抗體的時(shí)候,有的抗體說(shuō)明書(shū)中有推薦稀釋比例就按照該比例稀釋進(jìn)行實(shí)驗(yàn),但是有的抗體說(shuō)明書(shū)沒(méi)有推薦稀釋比例,那么我們就需要做大量的預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)摸索*的比例了。

    一般來(lái)說(shuō),抗體說(shuō)明書(shū)都會(huì)提供一個(gè)稀釋度范圍,但是,有些公司生產(chǎn)的抗體,其說(shuō)明書(shū)上沒(méi)有提供抗體稀釋度。這是可以理解的,因?yàn)槿绻f(shuō)明書(shū)上標(biāo)明的抗體稀釋度如果高的話,就說(shuō)明這種抗體效價(jià)不高,質(zhì)量不好。為此,實(shí)驗(yàn)者可以先在網(wǎng)上搜索一些相關(guān)的文獻(xiàn),文獻(xiàn)的方法與材料中一般會(huì)把抗體來(lái)源以及稀釋度都詳細(xì)的標(biāo)出的。但真正做實(shí)驗(yàn)時(shí),還是要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)樣品的情況和檢測(cè)指標(biāo)表達(dá)的豐富程度等因素先摸索一下抗體的稀釋度的。

    所以在做預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí),就采用倍比稀釋法,先做一個(gè)梯度,比如1:100,1:200,1:400,1:800,1:1600. 看看在這幾個(gè)梯度范圍內(nèi),樣品中的目的蛋白的表達(dá)情況,然后再?gòu)闹写_定你認(rèn)為的稀釋度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn),這樣做比較好一些。由于標(biāo)本類型、實(shí)驗(yàn)條件、操作環(huán)境等各種因素的影響,推薦濃度僅作為參考。

一抗稀釋液一般為PBS/0.4% Triton X-100/1%BSA。

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