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對(duì)酶聯(lián)免疫試劑盒的一些小疑問(wèn)解答

閱讀:591          發(fā)布時(shí)間:2014-9-12
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 1. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何?
產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過(guò)嚴(yán)格的穩(wěn)定測(cè)試,發(fā)貨前亦須通過(guò)檢測(cè)并提供質(zhì)檢報(bào)告,在市場(chǎng)上深受廣大客戶的贊許!

 2. 貴公司有沒(méi)有酶活性檢測(cè)的試劑盒?

酶活力的測(cè)定實(shí)際上就是測(cè)定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來(lái)表示,單位是U/g或U/ml。ELISA的方法一般是對(duì)可溶性抗原或抗體進(jìn)行定性和定量的檢測(cè),所以酶活性是不能用ELISA來(lái)檢測(cè)的。

 3. 一次ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)需要多長(zhǎng)時(shí)間?

雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要4-4.5小時(shí),競(jìng)爭(zhēng)ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時(shí)。

 4. 血清樣本如何處理?

全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃放置一個(gè)晚上后后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

 5. 血漿樣本如何處理?

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

 6. 尿液樣本如何處理?

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

 7. 細(xì)胞上清液樣本如何處理?

檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

 8. ELISA試劑盒組織樣本如何處理?

用預(yù)冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。

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