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細胞株培養(yǎng),您會嗎?
閱讀:1513 發(fā)布時間:2019-3-6上海恒遠專業(yè)主營:細胞培養(yǎng)基,細胞株,ELISA試劑盒,生化試劑,抗體,血清等科研產(chǎn)品,從事生物科研領(lǐng)域近10年,在同行中以產(chǎn)品齊全、價格合理、經(jīng)營穩(wěn)健、信息反饋及時等優(yōu)勢脫穎而出。今日給大家?guī)淼木褪羌毎甑呐囵B(yǎng),您了解多少呢?恒遠小編為您帶來的相關(guān)文獻,一起來瞧瞧!
細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。國內(nèi)資shen的細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培養(yǎng)細胞。
細胞株培養(yǎng)技術(shù)的三大要點:
一、取材
細胞株培養(yǎng)的材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位,瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng),因故不能立即培養(yǎng)者,可凍存。細胞株的培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織。
二、成纖維細胞排除
在細胞株培養(yǎng)中?;祀s有一些成纖維細胞,培養(yǎng)時能與瘤細胞同時生長,并常壓過癌細胞,導(dǎo)致癌細胞生長受阻以至消失,應(yīng)仔細排除。排除方法常有:機械刮除法、反復(fù)貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。
三、提高細胞培養(yǎng)存活率和生長率
根據(jù)實驗經(jīng)驗,細胞株要經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長,因此不能局限于一般培養(yǎng)法,須采用一些特殊措施。如:用適宜底物,鼠尾膠原底層及飼細胞底層等。用細胞生長因子,根據(jù)細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子,如胰島素、雌激素等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。
總而言之,在細胞株待轉(zhuǎn)化細胞數(shù)量明顯上升,并出現(xiàn)細胞團塊后,可轉(zhuǎn)入細胞培養(yǎng)瓶中,加培養(yǎng)基,常溫培養(yǎng)半個月,一般每隔一周觀察一次,決定是否換液、傳代,靠譜的細胞株的每個步驟都至關(guān)重要。細胞生長達一定數(shù)量后凍存,凍存前應(yīng)進行核型分析和存檔。
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