elisa原理  elisa法    人血小板反應蛋白試劑盒

產品名稱：人血小板反應蛋白試劑盒
英文名稱：Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA KIT
種屬：人
使用范圍：科研
產品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標本齊全：血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關節(jié)液、胸腔溢液等…
經營品牌:ＲＤ?。遥隆。桑拢?br>保存條件：2-8℃
有效期：６個月
運輸條件：低溫運輸，用干冰或者冰袋低溫運輸。

ELISA常用的幾種方法
一、雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原，形成抗原-抗體復合物;
加抗原免疫第二種動物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復合物;
加酶標抗抗體（第二種動物抗體的抗體）;
加底物。底物的降解量＝抗原量。
二、直接法測定抗原
將抗原吸附在載體表面；
加酶標抗體，形成抗原—抗體復合物；
加底物。底物的降解量＝抗原量。
三、間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面；
加抗體, 形成抗原-抗體復合物；
加酶標抗體；
加底物。 測定底物的降解量＝抗體量。

競爭法可用于測定抗原，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，因此結合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量成反比。操作步驟如下：
　?。?）將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。
　　（2）待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原，則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合，競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會，使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原，保溫后，酶標抗原與固相抗體的結合可達zui充分的量。洗滌。
　　（3）加底物顯色：參考管中由于結合的酶標抗原zui多，故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡，表示標本中抗原含量越多。
Elisa間接法、競爭法、捕獲法，應用親和素和生物素的ELISA
　　親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結合?，F在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。生物素又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，生物素-羥基琥珀亞胺酯（BNHS）可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合，雖不屬免疫反應，但特異性強，親和力大，兩者一經結合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯起來，就可大大提高ELISA的敏感度。

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