您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品分類(lèi)品牌分類(lèi)
-
混勻儀|混合器 氣體發(fā)生器 分光測(cè)色計(jì) 勻漿機(jī) 研磨機(jī) 超凈工作臺(tái) 洗板機(jī) 高低溫試驗(yàn)箱 恒溫金屬浴 電阻爐 溶劑過(guò)濾器 漩渦混合儀|旋渦混勻儀 均質(zhì)器 水槽 恒溫水槽 手套 培養(yǎng)板 生物安全柜 天平 滴定管 瓶口分液器 光澤儀 錐入度儀 濁度計(jì) 分析儀 冷藏保存箱 色差儀 超純水機(jī) 預(yù)制冷槽 油浴槽 冷卻水循環(huán)裝置 溶媒回收裝置 恒溫水浴槽 液氮罐 馬弗爐 酶標(biāo)儀 培養(yǎng)箱 電泳儀 潔凈工作臺(tái) 干燥箱 磁力攪拌器 滅菌器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 低溫冰箱 防爆冰箱 離心機(jī) 振蕩器 移液器 真空泵
選購(gòu)適合自己的熒光定量PCR儀注意事項(xiàng)
1、儀器的檢測(cè)通量
在購(gòu)買(mǎi)定量PCR儀的時(shí)候要根據(jù)實(shí)驗(yàn)實(shí)的需要來(lái)選擇不同通量的儀器。目前市面上的熒光定量PCR的檢測(cè)通量小到16個(gè)多到384個(gè)。如果進(jìn)行一般的基因表達(dá)研究或病原體檢測(cè)，實(shí)在不必購(gòu)買(mǎi)昂貴的儀器，96孔的通量足夠用；需要尋找要新藥靶點(diǎn)和疾病標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)室可以考慮購(gòu)買(mǎi)384孔板的儀器。假如經(jīng)費(fèi)有限無(wú)法購(gòu)買(mǎi)384孔板儀器的實(shí)驗(yàn)室，可以考慮購(gòu)買(mǎi)運(yùn)行速度快（帶有FAST模塊）的96孔板熒光定量PCR儀。
2、硬件設(shè)計(jì)特點(diǎn)
熒光定量PCR儀主要有傳統(tǒng)的96孔板式、創(chuàng)新的離心式等，每種設(shè)計(jì)都有它的獨(dú)到之處但也都有無(wú)法避免的缺憾。
傳統(tǒng)的96孔板的熒光定量PCR可以容納的樣本量大，而且無(wú)需特殊的耗材。有些傳統(tǒng)的96孔板的儀器采用鹵鎢燈激發(fā)、CCD檢測(cè)，這些光學(xué)結(jié)構(gòu)在96孔板的頂部，每個(gè)樣品孔距光源和檢測(cè)器的光程各不相同——邊緣效應(yīng)，對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。為了保證、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這類(lèi)儀器在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中通常會(huì)使用ROX（一種熒光染料）或的Reference dye作為參照校正實(shí)驗(yàn)結(jié)果。鹵鎢燈的使用壽命短、更換成本較高已經(jīng)成為很多用戶頭痛的問(wèn)題。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中鹵鎢燈作為一種熱光源，產(chǎn)生較多熱能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有一定的影響。CCD的優(yōu)點(diǎn)就是可以同時(shí)掃描所有樣品中的熒光信號(hào)，但是靈敏度較低，而且同時(shí)檢測(cè)樣品間的熒光信號(hào)存在干擾。像ABI、Bio-rad 公司生產(chǎn)的熒光定量PCR就屬于這一種。但Bio-rad的IQ系列熒光定量PCR帶有梯度功能。
創(chuàng)新的離心式的儀器通常選用LED激發(fā)、PMT檢測(cè)，離心式的設(shè)計(jì)上避免了邊緣效應(yīng)。LED光源是冷光源對(duì)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響，因此無(wú)需采用其他熒光染料校正儀器，而且使用壽命長(zhǎng)無(wú)需經(jīng)常更換。PMT每次只能收集單個(gè)熒光信號(hào)，但是檢測(cè)靈敏度高。但這類(lèi)儀器運(yùn)行速度非?？欤泊嬖跇颖玖啃?、耗材昂貴、沒(méi)有梯度功能、存在時(shí)間積分等缺點(diǎn)。Corbett 的Rotor-gene系列和Roche 的Lightcycler系列均為這一類(lèi)儀器。
隨著熒光定量PCR技術(shù)的使用，聰明的儀器生產(chǎn)商紛紛在傳統(tǒng)的96孔板儀器上大作改進(jìn)。首先是Stratagene的Mx3000p在檢測(cè)上突破了使用CCD改用PMT檢測(cè)熒光信號(hào)，大大提高了實(shí)驗(yàn)的靈敏度，但激發(fā)光源仍然沿用傳統(tǒng)的鹵鎢燈并且沒(méi)有梯度功能。Eppendorf 公司推出的Mastercycler ep realplex是一款帶有梯度功能的熒光定量PCR儀，使用了96個(gè)LED為激發(fā)光源，采用**的CPM（第二代PMT）及96合一光纖為檢測(cè)系統(tǒng)，不但避免了邊緣效應(yīng)還保證所有樣品間的熒光信號(hào)沒(méi)有干擾。