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prozyme PNGase F產(chǎn)品
PNGase F,肽-N- 糖苷酶F,肽-N 4 - (N- 乙?;?β-葡糖胺基)天冬酰胺酰胺酶,通過切割N-聚糖 的內(nèi)部GlcNAc和天冬酰胺(Asn)之間的切割,從而獲得完整的N-聚糖。)N-聚糖與肽連接的殘基。
通過用熱/ SDS處理使糖蛋白底物預(yù)先變性大大提高了N-聚糖去除的速率和可靠性,盡管在較高濃度下酶可以在天然條件下從糖蛋白中除去完整的聚糖。使用PNGase F進(jìn)行快速(5分鐘)去糖基化是我們Gly- X樣品制備平臺(tái)的一部分。
我們提供了許多不同的配方和包裝尺寸的PNGase F:
產(chǎn)品/包裝尺寸 | 濃度 | 重組 | EDTA |
GKE-5006A (100 mU), GKE-5006B (200 mU), GKE-5006D (1 U) | ≥2.5U / ml | ? | 1mM的 |
GKE-5016A (100 mU), GKE-5016B (200 mU), GKE-5016D (1 U) | ≥2.5U / ml | ? | 0 |
GKE-5016B (200 mU), GKE-5016D (1U) | ≥10U / ml | ? | 1 mM |
GKE-5020B (200 mU), GKE-5020D (1 U) | ≥10U / ml | ? | 0 |
GKE-5003 (100 mU) | ≥2.0U / ml |
| 5 mM |
一個(gè)單位的N-聚糖酶定義為在pH7.5和37℃下每分鐘催化1μmole變性核糖核酸酶B釋放N-連接寡糖所需的酶量。
緩沖劑和變性劑不提供1 U“D”包裝尺寸,但可根據(jù)要求提供。
歷*將EDTA包括在天然PNGase F制劑中作為穩(wěn)定劑。對(duì)于GKE-5020配方,我們重新考慮了這個(gè)想法,因?yàn)榭蛻粢蟛皇褂肊DTA的PNGase F配方。我們相信穩(wěn)定性不如酶的重組形式所關(guān)注。
尺寸
500個(gè)單位
選擇目錄號(hào): V4831
PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一個(gè)重組糖苷酶,從 Elizabeth-kingia miricola 克隆,并在大腸桿菌中過表達(dá)獲得。PNGase F 的分子量為 36kDa, 可以在 N-連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復(fù)合寡糖部分內(nèi)側(cè)的 N- 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間進(jìn)行切割(圖1)。PNGase F 不會(huì)去除常見植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 巖藻糖連接的寡糖。
單位定義:一單位 PNGase F 指在 37℃可以 1 分鐘內(nèi)催化 1nm 變性核糖核酸酶 B(RNase B)去糖基化所需 PNGase F 的量。1 Promega 單位等于 1 IUB 毫單位。
分子量:PNGase F 分子量約為 36kDa 。
物理形態(tài):PNGase F 溶于 20mM Tris-HCl(pH 7.5,25℃),50mM NaCl和 5mM EDTA緩沖液中,濃度為10,000u/ml。
應(yīng)用:
• 蛋白是否被糖基化的特征
• 確定蛋白的糖基化位點(diǎn)
• 聚糖結(jié)構(gòu)特征
• 蛋白運(yùn)輸
PNGase F對(duì)N-聚糖的切割特異性。
重組PNGase F使多種底物去糖基化。
示意圖說明了PNGase F的使用和N-糖基化的質(zhì)譜分析。
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