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上海起發(fā)實驗試劑有限公司資料大小
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1381次omegabiotek D6943-01說明書
E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, (V-spin)
使用旋轉(zhuǎn)微型柱從1-5mL細菌培養(yǎng)物中分離質(zhì)粒DNA
SKU:D6943-01類別:細菌質(zhì)粒標簽:D6943-00,D6943-01,D6943-02
EZNA®PlasmidMini Kit I設計用于在30分鐘或更短的時間內(nèi)從1-5 mL細菌培養(yǎng)物中分離出多達30μg的高質(zhì)量質(zhì)粒DNA。使用HiBind®MiniColumn技術(shù)將質(zhì)粒DNA純化簡化為三個快速步驟:結(jié)合,洗滌和洗脫。純化的質(zhì)粒DNA可立即用于各種下游應用,例如常規(guī)篩選,限制酶消化和手動/自動熒光DNA測序。
EZNA®質(zhì)粒微型試劑盒可提供2種不同類型的色譜柱:V型旋轉(zhuǎn)色譜柱帶有附加蓋(D6943),而Q型離心色譜柱則無蓋(D6942)。在使用和應用方面,這些柱子是相同的。兩種色譜柱均可與真空或離心方案一起使用。
僅供研究使用。不用于診斷過程。
特征 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
---|---|
下游應用 | 克隆; 桑格排序,轉(zhuǎn)型等 |
起始材料 | 1-5mL LB培養(yǎng)物 |
質(zhì)粒類型 | 高拷貝,低拷貝,粘粒DNA |
處理模式 | 手動,離心或真空 |
吞吐量 | 1-24 |
DNA結(jié)合技術(shù) | 硅膠微型旋轉(zhuǎn)柱 |
裂解液清除方法 | 離心 |
處理時間 | <30分鐘 |
產(chǎn)量 | 高拷貝數(shù)15-25μg; 低拷貝數(shù)0.1-5μg |
特別說明 | 停用酵母質(zhì)粒試劑盒的替代方案 |
項目 |
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HiBind®DNA微型柱 |
2 mL收集管 |
解決方案一 |
解決方案II |
解決方案III |
HBC緩沖液 |
DNA洗滌緩沖液 |
RNase A. |
洗脫緩沖液 |
DNA濃度比較
圖1. 根據(jù)制造商推薦的方案進行用pGEM載體轉(zhuǎn)化的4mLDH5α培養(yǎng)物。通過NanoDrop®2000c的光密度測量確定質(zhì)粒DNA濃度。總洗脫體積為50μL。
超卷曲DNA
圖2. 根據(jù)標準方案分離用pGEM載體轉(zhuǎn)化的1mLDH5α培養(yǎng)物。在1%瓊脂糖凝膠上分析5μL洗脫物質(zhì)粒DNA。
Nanodrop的DNA定量分析
表1. 用pGEM載體轉(zhuǎn)化的1mLDH5α培養(yǎng)物。通過NanoDrop®2000c的光密度測量確定質(zhì)粒DNA濃度??傁疵擉w積為50μL。
桑格測序
表2. 用EZNA質(zhì)粒Mini Kit I純化的質(zhì)粒DNA用于5μLSanger測序反應。在Applied Biosystems 3730XL上分析DNA。
內(nèi)毒素水平
表3. 質(zhì)粒DNA制備物中的內(nèi)毒素。按照每個制造商推薦的方案,從0.8mL LB培養(yǎng)物中分離質(zhì)粒DNA。用Thermo Scientific的Pierce LAL Chromogenic Endotoxin Quantitation Kit測定內(nèi)毒素水平。
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