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上海起發(fā)實驗試劑有限公司資料大小
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497次kamiya KT-354說明書
大鼠微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗
微量白蛋白的定量測定
在大鼠生物樣品中
貨號:KT-354
Rat Microalbumin ELISA
微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗大鼠
貨號KT-354
預(yù)期用途
大鼠微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫分析方法,用于大鼠生物樣品中微量白蛋白的定量測定。僅供研究使用。
引言
白蛋白是一種多功能蛋白,通過血流動力學(xué)、轉(zhuǎn)運和營養(yǎng)機(jī)制促進(jìn)體內(nèi)平衡。在所有哺乳動物和許多低等脊椎動物的血管內(nèi)和血管外都發(fā)現(xiàn)了白蛋白。它是由肝臟合成的約67000道爾頓的分子。通常只有極少量的白蛋白逃過腎小球的再吸收,并被排泄到尿液中。許多隱匿性疾病可導(dǎo)致腎臟損害,這可能導(dǎo)致過量的血清蛋白,包括白蛋白,被腎臟和尿排出。
該ELISA可用于測定血清、組織提取物和其他生物流體中的白蛋白。
原則
雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗的原理如圖1所示。在本試驗中,樣品中的白蛋白與已吸附到聚苯乙烯微滴定孔表面的抗-alb抗體反應(yīng)。清洗去除未結(jié)合蛋白后,加入與辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合的抗-Album抗體。這種HRP結(jié)合抗體與先前結(jié)合的白蛋白形成復(fù)合物。在另一洗滌步驟之后,通過添加顯色底物3,3',5,5’-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)來分析與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合酶的數(shù)量與被測樣品中白蛋白的濃度直接相關(guān);因此,在450 nm處的吸收是對被測樣品中白蛋白濃度的測量。這個
從校準(zhǔn)器建立的校準(zhǔn)曲線中插入試樣中的白蛋白量,并對樣品稀釋進(jìn)行校正。
圖1.
1.固相結(jié)合抗白蛋白抗體
2.添加校準(zhǔn)器和樣品
3.形成白蛋白*抗白蛋白復(fù)合物
4.去除未結(jié)合的樣本蛋白質(zhì)
5.添加抗alb-hrp共軛物
5.抗ALB HRP*ALB*抗ALB形成的復(fù)合物
6.去除未結(jié)合的抗ALB HRP
7.添加TMB基板
8.測定結(jié)合酶活性
組件
1。稀釋濃縮液
一瓶含有50毫升5倍濃縮稀釋劑的緩沖液。
2。濃縮洗滌液
一瓶含有50毫升20倍濃縮洗滌液。
三。酶抗體結(jié)合濃縮物
一小瓶含有150微升100倍濃縮親和力純化的抗大鼠白蛋白抗體,該抗體與HRP在A中結(jié)合。
穩(wěn)定緩沖器。
4。TMB基質(zhì)溶液
一瓶含有12毫升TMB和過氧化氫的檸檬酸緩沖液,pH3.3。
5。停止解決方案
一瓶含有12毫升0.3米硫酸。
警告:避免接觸皮膚。
6。微量滴定板
12個可拆卸的8個井條,位于井架框架內(nèi)。用親和力純化的抗鼠白蛋白包被。
7。大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器
一瓶含有凍干大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器。
8。陽性對照
一瓶含有50升血清和0.1%Sodium azide。濃度見控制證書。
所需但未提供的材料
•用于制造和分配稀釋液的精密移液管(2μl至200μl)
•試管
•微孔板清洗機(jī)/吸氣機(jī)
•蒸餾水或去離子水
•微型板閱讀器
•用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
•計時器
注意事項
1。開始分析前仔細(xì)閱讀說明。
2。此套件僅供研究使用。
三。為保證本產(chǎn)品的質(zhì)量和可靠性,我們付出了很大的努力。但是,有可能
在這種情況下,由于干擾因素的高水平,可能會得到不尋常的結(jié)果。
4。防腐劑
陽性對照品含有0.1%Sodium azide。
5。不需要添加劑或防腐劑來保持樣品的完整性。避免疊氮污染。
6。濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞抑制酶反應(yīng)。
7。其他注意事項:
不要交換不同批次的套件組件。
請勿在到期日后使用套件組件。
防止試劑受到陽光直射。
不要用嘴吸液。
不要在使用試劑的地方吃、喝、吸煙或使用化妝品。
使用手套避免接觸試劑。
停止溶液含有稀硫酸??赡艽碳ぱ劬推つw。之后用水沖洗
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