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暗場(chǎng)生物顯微鏡的使用方法及應(yīng)用領(lǐng)域

閱讀:157      發(fā)布時(shí)間:2025-5-31
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使用方法
 
1.安裝暗場(chǎng)聚光器:檢查聚光器的光軸是否與顯微鏡的光路一致,通過(guò)中心調(diào)節(jié)旋鈕合軸調(diào)整,使圈錐光束的交點(diǎn)集中到標(biāo)本平面上。
 
2.放置標(biāo)本:在聚光鏡前透鏡與載物片之間必須浸油,以防止來(lái)自標(biāo)本細(xì)節(jié)的反射光和衍射光束在載物玻片表面進(jìn)行全反射,影響觀(guān)察結(jié)果。
 
3.調(diào)節(jié)聚光鏡焦點(diǎn):操縱光源會(huì)聚透鏡,使圓錐形光束的交點(diǎn)準(zhǔn)確照射到標(biāo)本平面上。
 
4.選擇物鏡:不能使用油浸系或水浸系的物鏡,干燥系物鏡中也要挑選鏡率在0.85以下的物鏡,Zeiss廠(chǎng)出售的本身帶有可調(diào)光欄的物鏡最為適用。
 
5.選擇光源:根據(jù)實(shí)際需求選擇光強(qiáng)合適的光源,如超聚光鏡觀(guān)察膠體微粒運(yùn)動(dòng)時(shí),光強(qiáng)越大越好。
 
6.浸油方法:聚光鏡與載玻片間浸油時(shí)要特別注意避免氣泡,氣泡會(huì)導(dǎo)致暗視野觀(guān)察效果完全被破壞。
 
應(yīng)用領(lǐng)域
 
生物學(xué)研究:用于觀(guān)察活細(xì)胞、細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)等微生物的形態(tài)、運(yùn)動(dòng)和分布,以及細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器、纖維等結(jié)構(gòu),如觀(guān)察細(xì)菌的鞭毛運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程等。
 
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn):在臨床檢驗(yàn)中,可用于檢測(cè)人體體液中的病原體,如血液中的瘧原蟲(chóng)、螺旋體,尿液中的尿管形、結(jié)晶等,有助于疾病的診斷和治療。
 
材料科學(xué):用于觀(guān)察材料表面的微觀(guān)結(jié)構(gòu)、缺陷和雜質(zhì),如金屬材料的晶界、半導(dǎo)體材料的位錯(cuò)等,對(duì)材料的性能研究和質(zhì)量控制具有重要意義。
 
膠體化學(xué):可觀(guān)察膠體粒子的布朗運(yùn)動(dòng)、大小、形狀和分布,研究膠體的穩(wěn)定性、凝聚現(xiàn)象等,為膠體化學(xué)的理論研究和實(shí)際應(yīng)用提供重要依據(jù)。
 
優(yōu)缺點(diǎn)
 
優(yōu)點(diǎn):可以觀(guān)察到普通顯微鏡難以看清的微小物體和結(jié)構(gòu),提高了對(duì)微小顆粒的分辨率;無(wú)需對(duì)標(biāo)本進(jìn)行染色處理,避免了染色過(guò)程對(duì)標(biāo)本的損傷和變形,有利于觀(guān)察活細(xì)胞和生物大分子的動(dòng)態(tài)行為;圖像具有較高的對(duì)比度,使物體的輪廓和運(yùn)動(dòng)更加清晰可見(jiàn)。
 
缺點(diǎn):只能觀(guān)察物體的輪廓和運(yùn)動(dòng),無(wú)法分辨其微細(xì)結(jié)構(gòu);需要較強(qiáng)的光源,高亮度的光線(xiàn)可能會(huì)對(duì)某些光敏性標(biāo)本造成損傷;對(duì)樣品的制備和操作要求較高,如樣品必須均勻、透明,且厚度適中,否則會(huì)影響觀(guān)察效果。

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