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技術(shù)文章

大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)原理

閱讀:252          發(fā)布時(shí)間:2017-9-25

大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計(jì)算樣本中VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)含量。
操作步驟
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對(duì)照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)。
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。
7、溫育:重復(fù)4的操作。
8、洗板:重復(fù)5的操作。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
大鼠ELISA試劑盒雞α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC)ELISA Kit    英文名:    Chicken α-ketoglutarate dehy-drogenase,α-KGDHC ELISA Kit
雞α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA Kit    英文名:    Chicken α-Glucosidase ELISA Kit
雞α干擾素(IFN-α)ELISA Kit    英文名:    Chicken Interferon α,IFN-α ELISA Kit
雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)ELISA Kit    英文名:    Chicken alpha 1-acid glycoprotein,OGCHI ELISA kit
雞α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)ELISA Kit    英文名:    Chicken alpha/beta hydrolase domain-containing protein 5,ABHD5 ELISA kit
雞Toll樣受體4(TLR4)ELISA Kit    英文名:    chicken toll-like receptor 4,TLR4 ELISA kit
雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit    英文名:    Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
雞HSP90抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp90 antibody IgM ELISA Kit
雞HSP90抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp90 antibody IgG ELISA Kit
雞HSP72抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp72 antibody IgM ELISA Kit
雞HSP72抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp72 antibody IgG ELISA Kit
雞HSP60抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp60 antibody IgM ELISA kit
雞HSP60抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp60antibody IgG ELISA kit
雞HSP27抗體(IgG)ELISA ki    英文名:    Chicken Hsp27antibody IgG ELISA kit
雞HSP27 IgM 抗體ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp27 IgM antibody ELISA kit
雞G0/G1期開(kāi)關(guān)基因(G0S2)ELISA Kit    英文名:    Chicken G0/G1 switch gene 2,G0S2 ELISA Kit
雞FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA Kit    英文名:    Chicken Protein FAM172A,FAM172A ELISA kit
雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA Kit    英文名:    Chicken C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit
雞CD8分子(CD8)ELISA Kit    英文名:    Chicken Cluster of differentiation 8,CD8 ELISA Kit
雞CD4分子(CD4)ELISA Kit    英文名:    Chicken Cluster of Differentiation 4,CD4 ELISA Kit
雞CD3分子(CD3)ELISA Kit    英文名:    Chicken Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit
雞5羥色銨/血清素/血清銨(5HT/ST)ELISA Kit    英文名:    Chicken 5-hydroxytryptamine/serotonin,5HT/ST ELISA kit
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA Kit    英文名:    Chicken 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit
雞Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit    英文名:    Chicken collagen type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA kit
雞Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA Kit    英文名:    Chicken cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit
雞13,14二氫15-酮前列腺素F2α(PGFM)ELISA Kit    英文名:    Chicken 13,14-dihydro-15-keto-prostaglandin F2-alpha,PGFM ELISA Kit
雞1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA Kit    英文名:    Chicken inositol 1,4,5,-trisphosphate,IP3 ELISA kit
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA Kit    英文名:    Chicken 1,3-βD glucosidase ELISA Kit
猴ELISA Kit    英文名:    
猴組銨(HIS)ELISA Kit    英文名:    Monkey histamine,HIS ELISA kit大鼠ELISA試劑盒

 

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