人ELISA試劑盒實驗步驟:

1.  以稀釋液將待檢標本做適當稀釋（預試中確定）加入包被有已知抗原的酶標板中（50ul/孔），加封口膠帶于37℃作用30min。

2.  棄反應液，以沖洗液連續(xù)洗板5次并于吸水紙上拍干。

3.  加入酶標抗體（濃度在預試中確定）。加封口膠帶后于37℃作用30min。

4.  重復第2步。

5.  加底物（濃度在預試中確定），加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min，其間不時觀察，顯色滿意后加終止液50ul/孔。

6.  于酶標儀測定OD值，OPD用492nm測定，TMB用450nm測定。
人ELISA試劑盒優(yōu)點：

（1）特異性高：進行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應和干擾導致的實驗數(shù)據誤差。

（2）精度高：通過加標回收率和線性稀釋實驗，確保樣本值的準確性，度高于同類產品（較低的CV%）。

（3）重復性好：lot-to-lot檢測確保zui小的批間差異。 

（4）可靠性強：經優(yōu)化的試劑盒組分可有效的阻止假陽性和假陰性試驗結果。 

（5）標準曲線：在保證數(shù)據的前提下提供較寬的檢測范圍，以滿足需求。 

（6）價格低廉：*試劑，國內分裝配置，大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產試劑盒的顧慮。

人ELISA試劑盒注意事項:

1.  每次實驗均應做陰性對照、陽性對照及空白對照（以PBS代替標本），后者為本底值，在分析實驗結果時應扣除本底值，陽性對照<陰性對照<空白對照實驗成立。

2.  一般認為小分子抗原宜用本法檢測，而大分子抗原則宜采用夾心法檢測，但具體宜采用哪種方法應根據試驗決定，本發(fā)與夾心法相比在操作上減少一步。包被抗體與酶標抗體如果分別采用單克隆抗體和多克隆抗體時，宜用單克隆抗體作為包被抗體，以多克隆抗體作為酶標抗體。

3.  血清標本中抗原濃度一般較低，故一般用原倍標本進行檢測，必要時可進行稀釋測定，但應重新摸索酶標抗原的濃度，以確保方法的靈敏性。

4.  以酶標記抗原的方法同酶標記抗體。

5.  其它注意事項同酶聯(lián)免疫間接法。